材料与方法
１．１ 主要材料与药品 手动组织研磨玻璃匀浆器（上海酶联生物科技有限公司），离心机（北京白洋医疗器械有限公司），家兔心肌纤维 Ｍａｓｓｏｎ染色试剂盒（上海酶联生物科技有限公司），重组人 ＲＬＸ（ＰｒｏＳｅｃＴａｎｐ－ｙＴｅｃｈｎｏＧｅｎｅＬｔｄ．公司 ），乌拉坦（上海伊卡生物技术有限公司，批号：２０１３０６０９），青霉素（山东鲁抗医药股份有限公司，批号：０１５３８０），３－硝基酪氨酸（３－ＮＴ）、ＲＬＸ、ＮＯ、ｃＧＭＰ、ＰＫＧ检测试剂盒（上海酶联生物科技有限公司）。
１．２ 方法
１．２．１ 动物分组 选取健康成年新西兰家兔 ２８只，体质量（２．０５±０．１９）ｋｇ，雌雄不限，购于宁波大学动物实验中心［许可证号：ＳＣＸＫ（浙）２０１２０００５］。随机分为假手术组６只，ＤＨＦ组６只、ＲＬＸ小剂量组８只，ＲＬＸ大剂量组８只。
１．２．２ 建立 ＤＨＦ模型及给药 参见文献［５］建立
ＤＨＦ模型。手术严格无菌操作，每只家兔术后给予３０万 Ｕ／（ｋｇ·ｄ）青霉素肌肉注射３ｄ，预防感染，术后精心饲养。术后第８周开始，使用微升注射器，经家兔耳缘静脉注射 ＲＬＸ，ＲＬＸ 小剂量组为３０μｇ／（ｋｇ·ｄ），ＲＯＸ大剂量组为 ９８μｇ／（ｋｇ·ｄ），给药时间２周。剂量标准参见文献［６］，三期临床试验表明，急性心力衰竭患者 ＲＬＸ最佳剂量为３０ ／（ｋ · μｇ ｇ
ｄ），再根据徐淑云教授主编的 《药理实验方法学》换算出家兔等效给药剂量为 ９８μｇ／（ｋｇ·ｄ）。ＤＨＦ组和假手术组不做任何处理，标准饲料饲养以做空白对照。
１．２．３ 血清钠尿肽和 ＲＬＸ测定及心肌匀浆指标测定 术后１０周给药结束，对各组家兔经耳缘静脉抽血、离心后取上清液－２０ 备检，采用ＥＬＩＳＡ 法检测各组家兔钠尿肽、ＲＬＸ；采用空气栓塞法处死各组加兔，迅速开胸取出心脏，快速置于装有预冷的生理盐水杯内充分洗净血液，滤纸吸干称重，去除心包、心房、右心室及脂肪组织等，切取部分左心室后壁称重，其余部分留作病理染色切片，按１ ９的体
质量体积比加入预冷的ＰＢＳ缓冲液（Ｈ７．４），在冰浴中充分研磨制成１０％匀浆液，３０００ｒ／ｍｉｎ离心２０ｍｉｎ，取０．４ｍｌ上清液 －２０ 备检。待标本收集完毕后，采用 ＥＬＩＳＡ 法检测各组家兔１０％心肌匀浆上清液３－ＮＴ，ＮＯ、ｃＧＭＰ、ＰＫＧ 活性。检测方法严格按照试剂说明书。
１．３ 统计学方法 采用ＳＰＳＳ１８．０统计软件，计量资料用 表示，采用单因素方差分析，
ｘ±ｓ Ｐ＜０．０５为差异有统计学意义。
２ 结 果
２．１ 假手术组与 ＤＨＦ组血清 ＲＬＸ水平比较 与假手术组比较，ＤＨＦ组血清ＲＬＸ水平明显升高，差
异有统计学意义［（４６６．３２±６．５２）／ｍｌｖｓ（２２２．４±ｐｇ
５．２９）ｐｇ／ｍｌ，Ｐ＜０．０５］。
２．２ ４组血清钠尿肽水平比较 与假手术组比较，ＤＨＦ组、ＲＬＸ小剂量组、ＲＬＸ大剂量组血清钠尿肽水平明显升高，差异有统计学意义（Ｐ＜０．０５）。与ＤＨＦ组比较，ＲＬＸ 大剂量组血清钠尿肽水平明显降低，差异有统计学意义（Ｐ＜０．０５），ＲＬＸ小剂量组血清钠尿肽水平有下降趋势，但差异无统计学意义（Ｐ＞０．０５，表１）。
２．３ ４组心肌匀浆指标比较 与假手术组比较，
ＤＨＦ组、ＲＬＸ小剂量组、ＲＬＸ大剂量组心肌匀浆３－ＮＴ水平明显升高，ＮＯ、ｃＧＭＰ、ＰＫＧ活性明显降低，差异有统计学意义（Ｐ＜０．０５）。与 ＤＨＦ 组比较，ＲＬＸ大剂量组心肌匀浆中 ＮＯ、ｃＧＭＰ、ＰＫＧ 活性明显升高，３－ＮＴ水平明显降低，差异有统计学意义（Ｐ＜０．０５），ＲＬＸ 小剂量组 ＮＯ、ｃＧＭＰ、ＰＫＧ 活性轻微升高，３－ＮＴ有下降趋势，但差异无统计学意义（Ｐ＞０．０５，表１）。
本实验尚存在不足之处：（１）实验动物数量偏少，可能导致一些数据波动、误差可能。
（２）选取的家兔雌雄不限，雌雄家兔的基础 ＲＬＸ 水平不同，可能会影响实验的结果。
（3） 在后续实验中，我们将对此补充改进，以获得更有意义的结论。
