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培养基制作和灭菌的方法以及步骤

运用的资料也各有差异,但从营养角度剖析,微生物培育基中一般含有微生物所必需的碳源、氮源、无机盐、成长素以及水分等。微生物培育基是供微生物成长、繁衍、代谢的混合养料。因为微生物具有不同的营养类型,对营养物质的要求也各不相同,加之研讨的目的不同,所以培育基的品种许多,其他,培育基还应具有合适的 pH 值、必定的缓冲才能、必定的氧化复原电位及合适的渗透压。为了到达特定要求的研讨,需求进行培育基制造和灭菌,那么微生物培育基该怎么制造与灭菌呢?
1. 分装
已过滤的培育基应进行分装. 假如要制造斜面培育基, 须将培育基分装于试管中. 假如要制造平板培育基或液体、半固体培育基, 则须将培育基分装于锥形瓶内。
2. 调度 pH 值
用 pH 试纸 (或 pH 电位计、氢离子浓度比色计) 检验培育基的 pH 值, 如不符合需求, 可用 10%HCl 或 10%NaOH 进行调度, 直到调度到配方要求的 pH 值中止。
3. 过滤
用滤纸、纱布或棉花趁热将已配好的培育基过滤. 用纱布过滤时, zui好折叠成六层, 用滤纸过滤时, 可将滤纸折叠成瓦棱形, 铺在漏斗上过滤。
3. 制造溶液
向容器内参与所需水量的一部分, 按照培育基的配方, 称取各种资料, 顺次参与使其溶解, zui终补足所需水分,对蛋白胨、肉膏等物质, 需加热溶解, 加热进程所蒸发的水分, 应在悉数资料溶解后加水补足。
制造固体培育基时, 先将上述已配好的液体培育基煮沸, 再将称好的琼脂参与, 持续加热至完全融化. 并不断拌和, 防止琼脂糊底烧焦。
4. 制造斜面培育基和平板培育基
培育基灭菌后, 如制造斜面培育基和平板培育基, 须趁培育基未凝聚时进行。
(1) 制造斜面培育基。在试验台上放 1 支长 0.5~1 米左右的木条, 厚度为 1 厘米左右,将试管头部枕在木条上, 使管内培育基天然歪斜, 凝聚后即成斜面培育基。
(2) 制造平板培育基。将刚刚灭过菌的盛有培育基的锥形瓶和培育皿放在试验台上, 点燃酒精灯, 右手托起锥形瓶瓶底, 左手拔下棉塞, 将瓶口在酒精灯上稍加灼烧, 左手翻开培育皿盖, 右手灵敏将培育基倒入培育皿中, 每皿约倒入 10 毫升, 以铺满皿底为度. 铺放培育基后放置 15 分钟左右, 待培育基凝聚后, 再 5 个培育皿一叠, 倒置过来, 平放在恒温箱里,24 小时后查看, 如培育基末长杂菌,即可用来培育微生物。