单克隆抗体制备时许多朋友会遇到这样的问题，即我们免疫用的蛋白为原核表达蛋白而目的蛋白是真核蛋白或b毒等，因为没有标准品我们做出来的抗体没有方法用标准品来验证是否与其发作反应，zui终导致我们做出的是无用抗体。以下内容为我公司试验室技能总结的几种方法供我们参考，期望对我们有所协助。
一、若要检测的抗原为某种新的b毒
方法：
1、许多做出该b毒某个蛋白的单克隆抗体；
2、许多搜集该b毒疑似感染动物或人血液，用PCR的方法进一步确认每份血液是否真的有该b毒存在；
3、将你做出的许多抗体中的一个做符号作为符号抗体，其他一切抗体作为包被抗体，检测第二步中确认阳性的血清，成果与阴性血清做对比，并画出点状分布图。若阳性血清大部分的点在阴性血清之上祝贺你找到配对抗体了；若成果相差不大，请从头符号一株抗体做相同试验。
二、若要检测抗原为某一细胞因子
方法：1、通过超表达的方法建立安稳表达的细胞系，留心要在目的蛋白上加相应的标签，以便纯化。若仅仅是找到配对抗体则不需求纯化乃至不需求建立安稳表达的细胞系瞬时转染就可完成，若要进一步作出标准曲线请纯化。
2、 将细胞系建立后，我们就可以拿到标准品了，做配对工作就相应简略。
3、若该种细胞因子可有某种阳性影响物许多影响而来，也可不做细胞系。用阳性影响物影响，我们细胞影响物的上清液来做标准品也可。