将血清从冷冻箱取出后,先置于2-8℃冰箱使之溶解,然后在室温下使之全溶。但有必要注意的是,溶解过程中有必要规矩地摇晃均匀。避免发作沉积物
1、冻结血清时,请依照所主张的逐步冻结法(-2℃至4℃至室温),若血清冻结时改变的温度太大(如-20℃至37℃,试验显现十分容易发作沉积物。
2、冻结血清时,请随时将之摇晃均匀,使温度及成分均一,减少沉积的发作
3、请勿将血清置于37℃太久。若在37℃放置太久,血清会变得混浊,同时血清中许多较不稳定的成分也会因此受到损害,而影响血清的质量。
4、血清的热灭活十分容易形成沉积物的增多,若非必要,可以无须做此过程。
5、若有必要做血清的热灭活,请恪守56℃,30分钟的原则,并且随时摇晃均匀。温度过高,时间过久或摇晃不均匀,都会形成沉积物的增多。 血清冻结后发现有絮状沉积物呈现,该怎么处理? 欲去除这些絮状沉积物,可以将血清分装至无菌离心管内,以400g略微离心,上清液即可接着参加培养基内一同过滤。但不主张以过滤的方法去除这些絮状沉积物,因为它可能会阻塞过滤膜。
何谓热灭活
一般是以56℃,30分钟来处理已冻结的血清,因为此加热过程,可以使补体去活化,而补体所参与的反应有:溶细胞活性,平滑肌的缩短,肥大细胞和血小板组胺的释放,增强吞噬效果,淋巴细胞、巨噬细胞的趋化和激活。
有必要做热灭活吗?
试验显现,通过正确处理的热灭活血清,对大多数的细胞而言是不需要的。经此处理过的血清对细胞的成长只要微小的促进,或完全没有任何效果,乃至一般因为高温处理影响了血清的质量,而形成细胞成长速率的下降。而通过热处理的血清,沉积物的形成会显著的增多,这些沉积物在倒竖显微镜下调查,像是 "小黑点",常常会让研究者误以为是血清遭受污染,而把血清放在37℃环境中,又会使此沉积物更增多,使研究者误认为是微生物的分裂扩增。购买的时分注意询问厂家是否是已灭活血清。