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培养细胞的诀窍有哪些

细胞但是许多生物学试验的主角。假设细胞长欠好,那么试验的效果也不会好到哪儿去。细胞但是许多生物学试验的主角。在此引见了让细胞高兴的十个窍门。
 1. 保证全部试验室材料都无菌 交叉污染是细胞培养的大敌。即便是最细微的污染,也可能毁了几个星期的效果。因培养箱内温暖湿润,真菌极易成长,因此必需留心定时清洁。此外,在将培养瓶、移液管及其他的相关物品放入超净台之前,使用酒精擦洗洁净,以避免污染。
2. 当心处置您的培养物 细胞培养的脆弱性怎样强调也不为过。强烈摇晃,或接连的温度不坚定可能会对成长产生晦气的影响。保证培养箱是程度的,温度均一,且远离电动仪器。此外,尽量避免一次处置多个细胞系,因为它可能会影响细胞的基因型和表型。您还应定时完成STR图谱分析,以确认细胞系的身份。
3. 在运用前正确冻住细胞 虽然冻住看起来是个简略的进程,但必需操作妥当,避免损伤细胞。长期暴露在高温条件下会使细胞无法铺板。因此,冻存管应当在37°C水浴中放置2分钟,然后用条件培养基稀释,以避免DMSO形成直接损伤。
4. 运用对数成长期的细胞 细胞培养进程共有3个阶段:停滞期、对数期战争台期,分别代表了低细胞成长、高细胞成长和无细胞成长。最有生机的细胞是健康的,快速团结的,在对数期以70-80%的调集度存在。
5. 在传代之前不要让细胞完好调集 调集度是指贴壁细胞占据培养瓶表面积的比例。完好调集意味着100%的表面都被贴壁细胞掩盖。一定要避免这种状态,因为它意味着细胞不能继续成长。不过,当务之急是运用活泼成长的细胞。
6. 挑选最*的培养基开发战略 在细胞培养进程中,培养基是操控产质量量、产量和本钱的最重要要素。必需针对每种培养物来定制培养基,以优化试验效果。在决议以哪种方式来开发您的培养基时,您有几个挑选。您可以置办现成的,本人开发,也可以与另一家公司协作开发特定的培养基。在这个进程中,您需求思索时间和本钱等要素。
7. 制造干粉培养基时点评水的质量 液体培养基常常会带来比干粉培养基更高质量的效果。这可能与水的质量有关。因为细菌在水中快速成长,故需求监控内毒素及其他污染物。商业公司有资源来监控和操控细菌成长,比方过滤器。因此运用商业化消费的液体培养基会更加可靠一点。
8. 使用细胞的代谢特性来优化培养基 分析运用过的培养基,有助于审定必要成分的代谢速率,包含氨基酸和维生素。从细胞成长阶段和蛋白消费阶段收集到的动态代谢图谱可用来均衡根底培养基和增加培养基,指导培养基的要点,有助于蛋白质的消费。
9. 避免细胞的过度消化 胰蛋白酶通过消化担任让细胞与容器分离的蛋白质,而完成贴壁细胞的传代。假设细胞暴露在胰酶中时间太长,则胰酶将开端切开细胞表面蛋白,这会影响细胞行驶正常功用的才能。
10. 培养基中不要不断运用抗生素 随着细胞培养物更加频频地暴露在抗生素中,对立生素有着天然耐药性的菌株将开端呈现。这种现象可掩盖潜在的污染。