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怎么挑选免疫组化中的一抗

 免疫组化实验是一种很紧密的实验,对抗体的挑选哪也有很高的要求,,免疫组化一切的抗体主要是一抗,今日就与您一同共享怎么挑选免疫组化中的一抗,下面我们就从下面五点来论说一下这个问题。

1.单克隆和多克隆抗体的挑选。由一种克隆产生的特异性抗体叫做单克隆抗体。单克隆抗体能方针明确地与单一的特异抗原决定簇结合,就像导弹精确地命中方针相同。另一方面,即使是同一个抗原决定簇,在机体内也能够由好几种克隆来产生抗体,形成好几种单克隆抗体混杂物,称为多克隆抗体。在抗原抗体反响中,一般单克隆抗体特异性强,但亲和力相对小,检测抗原灵敏度相对就低;而多克隆抗体特异性稍弱,但抗体的亲和力强,灵敏度高,但易呈现非特异性染色(能够经过关闭等避免)。

2.使用规模的挑选。有的一抗只能用于 WB ( Western blotting)或免疫组化、免疫荧光、免疫沉淀等;乃至标明石蜡切片或冰冻切片。

3.种属反响性的挑选。这一点很重要,标明这种抗体或许存在种属差异,且这种抗体合适检测哪种种属动物体内的抗原。

4.种属来历,一般兔来历的多是多克隆;而小鼠来历的多是单克隆,但也有别的。根据此来历来挑选相应的二抗。

5.生产厂家的挑选抗体,它的实际效价稳定是不同的,我们的客户大部分用前面者抗体做免疫组化作用较好,而后者做 WB 作用还能够。