试验人员的无菌准备:
1.肥皂洗手。
2.穿好阻隔衣、带好阻隔帽、口罩、放好拖鞋
3.用75%酒精棉球擦净双手。
无菌操作的演示:
1.但凡带入超净工作台内的酒精、PBS、培育基、胰蛋白酶的瓶子均要用75%酒精
擦洗瓶子的外外表
2.接近酒精灯火焰操作。
3.器皿运用前必须过火灭菌
4.继续运用的器皿(如瓶盖、滴管)要放在高处,运用时仍要过火。
5.各种操作要接近酒精灯,动作要轻、准确,不能乱碰。如吸管不能碰到废液缸。
6.吸取两种以上的运用液时要注意更换吸管,防止交叉污染。
准备室的设备:
单蒸馏水蒸馏器、双蒸馏水蒸馏器、酸缸、烤箱、高压锅、储品柜(放置未消毒物品)、储品规(放置消毒过的物品)、包装台。配液室的设备:扭力天平和电子天平(称量药品)、PH计(丈量培育用液PH值)、磁力搅拌器(装备溶液室搅拌溶液)。培育室的设备:
液氮罐、储品柜(存放杂物)、日光灯和紫外灯、空气净化器体系、低温冰箱(-80℃)、空调、二氧化碳缸瓶、边台(书写试验记载)。必须放在无菌间的设备:离心机(搜集细胞)、超净工作台、倒置显微镜、CO2孵箱(孵育培育物)、水浴锅、三氧消毒杀菌机、4℃冰箱(放置serum和培育用液)。无菌室的灭菌:
1.定时清扫无菌室:每周清扫一次,先用自来水拖地、擦桌子、超净工作台等,然后用3‰来苏尔或许新洁尔灭或许0.5%过氧乙酸擦洗。2.CO2孵箱(培育箱)灭菌:先用3‰新洁尔灭擦洗,然后用75%酒精擦洗或许0.5%过氧乙酸,再用紫外灯照耀
3.试验前灭菌:打开紫外灯、三氧杀菌机、空气净化器体系各20-30分钟
4.试验后灭菌:用75%酒精(3‰新洁尔灭)擦洗超净台、边台、倒置显微镜的载物台。