Elisa试剂盒检测方法·双抗体夹心法

1.将抗体包被在固相载体上。

2.如样品中含有抗原，则结合为抗原抗体复合物。

3.再加入酶标记抗体，则结合为抗体-抗原-酶标记抗体复合物。

4.酶催化底物并显色。双抗体夹心法原理图

·双抗原夹心法

1.将抗原包被在固相载体上。

2.如样品中含有抗体，则结合为抗原抗体复合物。

3.再加入酶标记抗原，则结合为抗原-抗体-酶标记抗原复合物。

4.酶催化底物并显色。双抗原夹心法原理图

提示：

双抗夹心法常用于抗原、蛋白等检测。

配对抗体3种形式：

①只有一个多抗

优点：成本低，耗时短。

缺点：灵敏度低，成功率低。

②一个多抗（包被），一个单抗（酶标记）

优点：成本适中，耗时适中（4-6个月），成功率较只有一个多抗高。

缺点：稳定性一般。

③单克隆抗体

优点：灵敏度高，稳定性好。

缺点：耗时久（6-8个月），成本高。

竞争法

以测小分子抗原为例，为标本中的小分子抗原和一定量的酶标抗原竞争与固相抗体结合。标本中小分子抗原量越多，结合在固相上的酶标抗原愈少，因此阳性反应呈色浅于阴性反应。

提示：

竞争法常用于小分子、lgA、lgG、lgM等检测。

Elisa试剂盒间接法

间接法是检测抗体最常用的方法，其原理为利用酶标记的抗抗体以检测已与固相抗原结合的受检抗体，故称为间接法。