保温的方式除有的ELISA试剂盒仪器附有特制的电热块外,一般均选用水浴,可将ELISA试剂盒板置于水浴箱中,ELISA板底应贴着水面,使温度敏捷平衡。
ELISA属固相免疫测定,抗原、抗体的结合只在固相表面上产生。以抗体包被的夹心法为例,加入板孔中的标本,其中的抗原并不是都有均等的和固相抗结合的时机,靠近孔壁的一层溶液中的抗原直接与抗体接触。这是一个逐步平衡的进程,因此需经扩散才能到达反响的结尾。在这以后加入的酶标记抗体与固相抗原的结合也相同如此。这就是为什么ELISA反响总是需求必定时刻的温育。
在ELISA试剂盒中一般有两次抗原抗体反响,即加标本和加酶结合物后。抗原抗体反响的完结需求有必定的温度和时刻,这一保温进程称为温育,有人称之为孵育,在ELISA试剂盒中似不恰当。为防止蒸腾,板上应加盖,也可用塑料贴封纸或保鲜膜覆盖板孔,此刻可让反响板漂浮在水面上。
ELISA试剂盒试验水浴保温办法:
1、可将ELISA试板置于水浴箱中,ELISA板底应贴着水面,使温度敏捷平衡。
2、为防止蒸腾,板上应加盖,也可用塑料贴封纸或保鲜膜覆盖板孔,可让反响板漂浮在水面上。
3、湿盒应先放在保温箱中预温至规则的温度,特别是在气温较低的时分更应如此。
4、操作时的室温应严厉约束在规则的范围内,规范室温温度是指20~25℃,但具体操作时可根据说明书的要求控制温育。
5、若用保温箱,应放在湿盒内,湿盒要选用传热性杰出的资料如金属等,在盒底垫湿的纱布,将ELISA板放在湿纱布上。
6、室温温育时,只要平置于操作台上即可。
7、无论是水浴还是湿盒温育,反响板均不宜叠放,以确保各板的温度都能敏捷平衡。
8、应注意温育的温度和时刻应按规则力求。
9、为确保这一点,一个人操作时,一次不宜多于两块板一起测定。
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