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16HBE人支气管上皮样细胞操作步骤

16HBE人支气管上皮样细胞操作步骤:
1. 吸走用于培养基,加入3-5mL PBS后轻轻晃动培养瓶润洗细胞。
2. 吸干净PBS后加入1mL 0.25%胰酶-0.53mM EDTA,轻轻摇晃培养皿使胰酶浸没细胞表面,培养瓶放37度培养箱消化;(细胞对于消化比较敏感,消化过度会严重影响细胞状态,导致细胞传代死亡漂浮或者传代后不长。细胞消化到细胞间隙变大但未脱落,可以轻轻吹下时即可终止,禁止消化到细胞完全漂浮。混匀细胞时尽量轻柔,不要吹出大量气泡。)
3. 加入6-8ml完全培养基终止消化,轻轻吹下细胞混匀。
4. 将混匀的细胞1000rpm(约150g)离心3min,弃上清,再用新鲜培养基重悬37度培养箱继续培养。
16HBE人支气管上皮样细胞传代比例 : 不同细胞生长速度不一,具体传代比例视细胞生长速度而定,大部分细胞适用1:3-1:4传代,生长较慢的细胞可以1:2传代。
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