呋喃妥因检测卡使用说明书

                                                         （胶体金法）

 

1 原理及用途

本产品应用竞争抑制胶体金免疫层析的原理制成，用于检测蜂蜜、组织、肝脏等样本中的呋喃妥因代谢物（AHD）。

样本溶液滴入检测卡的加样孔后，样本溶液中的呋喃妥因代谢物与金标抗体相结合，从而阻止金标抗体与纤维素膜上呋喃妥因偶联物结合。当样本溶液中的呋喃妥因代谢物含量大于检测限时检测线不显色（或显色比对照线浅），结果为阳性；当样本溶液中呋喃妥因代谢物含量小于检测限时检测线显紫红色（显色与对照线一致或更深），结果为阴性。

2 技术指标

2.1 试剂卡灵敏度：1ppb（ng/ml）

    对样本的最终检测限须以试剂卡灵敏度乘以样本处理的稀释比例。

2.2 样本检测下限：

蜂蜜、组织、肠衣、肝脏………………………0.5ppb

3 试剂盒组成

检测卡……………………50个/盒

样本复溶液……………………1瓶

衍生化试剂……………………1瓶

说明书…………………………1份

4 需要的器材和试剂

4.1 仪器：均质器 、氮气吹干装置、振荡器、离心机、刻度移液管、天平（感量0.01g）

4.2 微量移液器：单道20µl-200µl，100µl-1000µl

4.3试剂：乙酸乙酯、正己烷、氢氧化钠、浓HCl、K2HPO4·3H2O

5 样本前处理

5.1 样本处理前须知：

实验器具必须洁净并使用一次性吸头，以避免污染干扰实验结果。

5.2 配液：

配液1：0.1M  K2HPO4 溶液

    称11.4g K2HPO4▪3H2O加去离子水溶解定溶至500ml。

配液2：1M  HCL 

    8.6mL浓HCL加去离子水定容至100mL。

配液3：1M  NaOH溶液

    称取4g NaOH，加去离子水定容至100ml

5.3蜂蜜、组织、肠衣、肝脏样本处理方法

1）称取2±0.05g均质样本于离心管中，加入4m去离子水、0.5 ml 1M 盐酸溶液和100μl衍生化试剂，振荡5分钟；

2）在37℃过夜孵育(约16小时)或50℃（超过50℃时会影响分层效果）水浴孵育3小时；

3）分别加入5ml 0.1M K2HPO4 溶液，0.4ml 1M NaOH溶液和5ml的乙酸乙酯，振荡5分钟；

4）室温下4000转/分，离心10分钟；

5）取出2.5ml的上层液到另一个离心管中，50-60℃氮气或空气吹干；

6）用1ml正已烷溶解残留物，加入0.5ml复溶液充分振荡混合30秒；室温4000转/分，离心10分钟；

7）上层为正已烷，取下层样本液用于分析。

浓缩倍数为：2    检测下限：0.5ppb

6 实验步骤

6.1 撕开检测卡铝箔包装袋，取出检测卡，放于平整、洁净的台面上。

6.2 用配套吸管吸取已准备好的样本液体，缓慢、逐滴的（应避免泡沫产生）滴加2-3滴（约60ul）到加样孔（S）内。

6.3 室温下放置3-5分钟判断结果, 其他时间判读无效。

7 结果判断

阴性（-）：C线显红色，T线比C线显色深或者一样深，表示样本中呋喃妥因浓度低于检测下限，或不含有。

阳性（+）：C线显红色，T线比C线显色浅或者不显色，则表示样本中呋喃妥因浓度高于检测下限。

无效：未出现质控C线，表明操作过程不正确或检测卡已失效。

8 注意事项

8.1 过期或铝箔袋破损的产品，均不可使用。

8.2 检测卡从冰箱中取出时应恢复到室温后打开，打开的检测卡应尽快使用以免受潮后失效。

8.3 不要触摸检测卡中央的白色膜面。

8.4 取液滴管不可混用，以免交叉污染。

8.5 待检样品溶液需清亮、无混浊颗粒、无细菌污染，否则容易导致阻塞、显色不明显等异常现象，从而影响实验结果的判定。

9 贮藏及保存期

储藏条件：试剂盒于2-30℃干燥环境下保存。

保 质 期：该产品有效期为1年，生产日期见包装盒。

【生产企业】

企业名称：上海酶联生物科技有限公司

地    址： 上海市闵行区元江路5500号

电    话：4008-898-798  ，021-61725725  

传    真：021-54795560

邮    编：200070              

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