人宫颈癌细胞
(Hela)
细胞介绍
角蛋白免疫过氧化物酶染色阳性。有报告称MS751细胞含有人乳头状瘤病毒18 (HPV-18)序列。据报道，p53表达水平低，pRB(成视网膜细胞瘤抑制因子)表达水 平正常。
细胞特性
1)来源：宫颈腺癌
2)形态：上皮细胞样
3)含量：>lxl06 个/mL
4)污染：支原体、细菌、酵母和真菌检测为阴性
5)规格：T25瓶或者lmL冻存管包装
细胞培养步骤
1)培养基及培养冻存条件准备：
1.准备MEM培养基(GIBCO,货号41500034，添加NaHC031.5g/L，丙酮酸钠
O.llg八)，90%;优质胎牛血清，10%。
2.培养条件：气相：空气，95%;二氧化碳，5%。温度：37摄氏度，培养箱 湿度为70%-80%。
3. 冻存液：90%完全培养基，10%DMSO,现用现配。液氮储存。
2)细胞处理：
复苏细胞：将含有lmL细胞悬液的冻存管在37°C水浴中迅速摇晃解冻，加 入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补 加l-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜（或将 细胞悬液加入l〇cm皿中，加入约8ml培养基，培养过夜）。第二天换液并检 查细胞密度。
细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
对于贴壁细胞，传代可参考以下方法：
弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
力口 2m丨消化液（0.25%Trypsin-0.53mMEDTA)于培养瓶中，置于37°C培
养箱中消化1-2分钟，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部 分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
按6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在1000RPM条件下离心4分 钟，弃去上清液，补加l-2mL培养液后吹匀。
将细胞悬液按1: 2到1: 5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者 瓶中。
对于悬浮细胞，传代可参考以下方法：
方法一：收集细胞，1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加l-2mL 培养液后吹匀，将细胞悬液按1: 2到1: 5的比例分到新的含8ml培养基的 新皿中或者瓶中。
方法二：可选择半数换液方式，弃去半数培养基后，将剩余细胞悬起，将细 胞悬液按1: 2到1: 3的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
细胞冻存：待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。贴壁细胞冻存时，弃 去培养基后加入少量胰酶，细胞变圆脱落后，加入约lml含血清的培养基后 加入冻存管中，再添加1〇%DMSO后进行冻存。悬浮细胞冻存时，应将细胞 收集，1000RPM条件下离心4分钟，少量保存上清液（防止细胞吸走)，加 入部分新鲜培养基，加入到冻存管中，在冻存管中加入1〇%DMSO后进行冻 存。
注意事项：
收到细胞后，若发现干冰己挥发干净、冻存管瓶盖脱落、破损及细胞有污染，请立 即与我们联系。
所有动物细胞均视为有潜在的生物危害性，必须在二级生物安全台内操作，并请注 意防护，所有废液及接触过此细胞的器皿需要灭菌后方能丢弃。
运输和保存：可选择干冰运输及发送复苏存活细胞方式：（1)干冰运输，收到后 立即转入液氮冻存或直接复苏；（2)存活细胞，收到后应继续生长，传代达到细 胞生长状态良好时，再进行冻存。具体操作见细胞培养步骤。
细胞用途：仅供科研使用。
