大鼠肺泡巨噬细胞

(NR8383)

细胞介绍

NR8383(正常大鼠，1983年)来源于肺灌洗时的正常大鼠肺泡巨噬细胞。细胞在

gerbil肺细胞连续培养液存在下培养了大约8-9个月。随后，不再需要外源生长

因子。通过有限稀释法从单个细胞克隆并亚克隆NR8383细胞，并三次用软琼脂

亚克隆。细胞表现出巨噬细胞的特性，吞噬酵母多糖和铜绿，非特异性脂酶活性，

Fc受体，氧化降解；分泌IL-l,TGF-(3和IL-6,可重复地响应外源生长因子。NR8383

细胞响应博莱霉素，分泌TGF-0前体。在博莱霉素刺激下，TGF-(3mRNA表达也

上升。细胞对内毒素敏感。1-10钠克/毫升的LPS水平抑制增生达50%。即使达

到0.001毫克/毫升的水平，LPS抑制还是无毒且在后续过程中可逆的。NR8383

细胞株提供了高响应的肺泡巨噬细胞的均一来源，可以用于体外研究巨响细胞相

关活性。

细胞特性

1)来源：肺；巨噬细胞

2)形态：巨噬细胞，半悬浮生长

3)含量：>lxl06 个/mL

4)污染：支原体、细菌、酵母和真菌检测为阴性

5)规格：T25瓶或者lmL冻存管包装

细胞接受后的处理：

1)收到细胞后，请检查是否漏液，如果漏液，请拍照片发给我们。

2)请先在显微镜下确认细胞生长状态，去掉封口膜并将T25瓶置于37°C培养约

2-3h〇

3)弃去T25瓶中的培养基，添加6ml本公司附带的完全培养基。

4) 如果细胞长满（90%以上）请及时进行细胞传代，传代培养用6ml本公司附

带的完全培养基。

5)接到细胞次日，请检查细胞是否污染，若发现污染或疑似污染，请及时与我

们取得联系。

细胞用途：仅供科研使用。

本公司的细胞培养操作规程，供参考

一.培养基及培养冻存条件准备：

1.准备F-12K培养基（F-12K，GIBCO,货号21127-022)，90%;优质胎牛血清，

10%。

2.培养条件：气相：空气，95%;二氧化碳，5%。温度：37°C，培养箱湿度

 

为 70%-80%。

3.冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配。液氮储存。

二.细胞处理：

复苏细胞：将含有lmL细胞悬液的冻存管迅速放入37°C水浴中（水面要低

于冻存管盖部）摇晃解冻，移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心

管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，加入lmL培

养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。

第二天换液并检查细胞密度。

细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。

对于悬浮细胞，传代可参考以下方法：

方法一：收集细胞，1000RPM，常温条件下离心5分钟，弃去上清液，补加

l-2mL培养液后吹句，将细胞悬液按1: 2到1: 5的比例分到新的含8ml培

养基的新皿中或者瓶中。（该细胞建议使用第一种方法，将所有细胞收集起

来）

方法二：可选择半数换液方式，弃去半数培养基后，将剩余细胞悬起，将细

胞悬液按1: 2到1: 3的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。

细胞冻存：待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。悬浮细胞冻存时，应

将细胞收集，1000RPM，常温条件下离心5分钟，少量保存上清液（防止细

胞吸走)，加入部分新鲜培养基，吹打均匀后，加入到冻存管中，在冻存管

中加入10%DMSO摇匀后进行冻存。

注意事项：

收到细胞后，若发现干冰己挥发干净、冻存管瓶盖脱落、破损及细胞有污染，

请立即与我们联系。

所有动物细胞均视为有潜在的生物危害性，必须在二级生物安全台内操作，

并请注意防护，所有废液及接触过此细胞的器皿需要灭菌后方能丢弃。