人组织细胞淋巴瘤细胞

(U937)

所有动物细胞均视为有潜在的生物危害性，必须在二级生物安全台内操作，并请注意防护，所有废液及接触过此细胞的器皿需要灭菌后方能丢弃。

细胞介绍

该细胞是由Nilsson K实验室于1974年从一名37岁的患有恶性组织细胞性淋巴瘤的白人男性的胸水中分离建立的。1979年来的研究显示该细胞在人混合淋巴细胞培养物上清、佛波酯、VitD3、\z-IFN、TNF和维A酸的诱导下可以向终末单核细胞分化。该细胞不合成免疫球蛋白，EBV阴性；可产生溶菌酶、（3-2-微球蛋白，受PMA刺激后可产生TNF-ct;表达C3R;可作转染宿主；表达Fas，对TNF和抗Fas的抗体敏感。

细胞特性

1)来源：淋巴瘤

2)形态：单核细胞，悬浮生长

3)含量：>lxl06 个/mL

4)污染：支原体、细菌、酵母和真菌检测为阴性

5)规格：T25瓶或者lmL冻存管包装

运输和保存：使用T25瓶充液发送活细胞。收到细胞后，请先在显微镜下检查细胞生长状态，并将T25瓶置于培养箱约6h或过夜后，再次检查细胞状态。若状态良好，可按照以下细胞培养步骤进行细胞后续处理操作。若发现可疑污染物，请及时与我们取得联系。细胞用途：仅供科研使用。

细胞培养步骤

1)培养基及培养冻存条件准备：

1.准备 RPIVM-1640 培养基(RPIVM-1640:GIBCO,货号 31800022,添加 NaHC031.5g八,

D-葡萄糖2.5g八，丙酮酸钠O.llg八)，90%;优质胎牛血清，10%。

2.培养条件：气相：空气，95%;二氧化碳，5%。温度：37摄氏度，培养箱

湿度为70%-80%。

3.冻存液：90%完全培养基，10%DMSO,现用现配。液氮储存。

2)细胞处理：

复苏细胞：将含有lmL细胞悬液的冻存管在37°C水浴中迅速摇晃解冻，加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加l-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜（或将细胞悬液加入l〇cm皿中，加入约8ml培养基，培养过夜）。第二天换液并检查细胞密度。

细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。

对于悬浮细胞，传代可参考以下方法：

方法一：收集细胞，1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加l-2mL培养液后吹匀，将细胞悬液按1: 2到1: 5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。

方法二：可选择半数换液方式，弃去半数培养基后，将剩余细胞悬起，将细胞悬液按1: 2到1: 3的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。细胞冻存：待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。悬浮细胞冻存时，应将细胞收集，1000RPM条件下离心4分钟，少量保存上清液（防止细胞吸走)，加入部分新鲜培养基，加入到冻存管中，在冻存管中加入10%DMSO后进行冻存。

注意事项：

收到细胞后，若发现干冰己挥发干净、冻存管瓶盖脱落、破损及细胞有污染，请立即与我们联系。