人神经母细胞瘤细胞

(SH-SY5Y)

注意事项：

收到细胞后，若发现干冰己挥发干净、冻存管瓶盖脱落、破损及细胞有污染，请立

即与我们联系。

所有动物细胞均视为有潜在的生物危害性，必须在二级生物安全台内操作，并请注

意防护，所有废液及接触过此细胞的器皿需要灭菌后方能丢弃。

瓶中。

细胞介绍

SH-SY5Y是1970年建自骨瘤转移灶的神经母细胞瘤SK-N-SH细胞系经三次克隆后

的亚系(SK-N-SH—SH-SY—SH-SY5—SH-SY5Y)。该细胞显示中等水平的多巴胺-0 -

羟基酶活性。SH-SY5Y细胞的饱和密度大于1X106细胞/cm2。

细胞特性

1)来源：脑神经母细胞瘤，转移部位骨髓

2)形态：上皮细胞样

3)含量：>lxl06 个/mL

4)污染：支原体、细菌、酵母和真菌检测为阴性

5)规格：T25瓶或者lmL冻存管包装

运输和保存：使用含有优质胎牛血清的2ml冻存管发送存活细胞。收到细胞后，可在1000RPM，常温条件下，离心5min后，于洁净操作台弃去上清，加入推荐使用的培养基后转移至l〇cm培养皿或者T25培养瓶中培养，传代达到细胞生长状态良好时，再进行冻存。具体操作见细胞培养步骤。细胞用途：仅供科研使用。

细胞培养步骤

1)培养基及培养冻存条件准备：

1.准备 MEM 及 F-12 培养基(MEM:GIBCO,货号 11095-080)，45%; F-12(F-12: GIBCO,

货号11765-054)，45%;优质胎牛血清，10%。

2. 培养条件：气相：空气，95%;二氧化碳，5%。温度：37摄氏度，培养箱

湿度为70%-80%。

3. 冻存液：90%完全培养基，10%DMSO,现用现配。液氮储存。

2)细胞处理：

复苏细胞：将含有lmL细胞悬液的冻存管在37°C水浴中迅速摇晃解冻，加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加l-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜（或将细胞悬液加入l〇cm皿中，加入约8ml培养基，培养过夜）。第二天换液并检查细胞密度。细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。

对于贴壁细胞，传代可参考以下方法：

弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。力口 2m丨消化液（0.25%Trypsin-0.53mMEDTA)于培养瓶中，置于37°C培养箱中消化1-2分钟，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部 按6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在1000RPM条件下离心4分钟弃去上清液，补加l-2mL培养液后吹匀。将细胞悬液按1: 2到1: 5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者细胞冻存：待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。贴壁细胞冻存时，弃去培养基后加入少量胰酶，细胞变圆脱落后，加入约lml含血清的培养基后

加入冻存管中，再添加1〇%DMSO后进行冻存。