人非小细胞肺癌细胞(NCI-H524)

细胞介绍

该细胞1982年建系，源自非小细胞肺癌男性患者的转移淋巴结。

细胞特性

1)来源：肺癌

2)形态：圆形，悬浮生长

3)含量：>lxl06 个/mL

4)污染：支原体、细菌、酵母和真菌检测为阴性

5)规格：T25瓶或者lmL冻存管包装

运输和保存：可选择干冰运输及发送复苏存活细胞方式：（1)干冰运输，收到后

立即转入液氮冻存或直接复苏；（2)存活细胞，收到后应继续生长，传代达到细

胞生长状态良好时，再进行冻存。具体操作见细胞培养步骤。

细胞用途：仅供科研使用。

细胞培养步骤

1)培养基及培养冻存条件准备：

1.准备 RPIVM-1640 培养基(RPMI-1640:GIBCO,货号 31800022)，90%;优质胎牛血

清，10%。

2.培养条件：气相：空气，95%;二氧化碳，5%。温度：37摄氏度，培养箱

湿度为70%-80%。

3.冻存液：90%完全培养基，10%DMSO,现用现配。液氮储存。

2)细胞处理：

复苏细胞：将含有lmL细胞悬液的冻存管在37°C水浴中迅速摇晃解冻，加

入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补

加l-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜（或将

细胞悬液加入l〇cm皿中，加入约8ml培养基，培养过夜）。第二天换液并检

查细胞密度。

细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。

对于悬浮细胞，传代可参考以下方法：

方法一：收集细胞，1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加l-2mL

培养液后吹匀，将细胞悬液按1: 2到1: 5的比例分到新的含8ml培养基的

新皿中或者瓶中。

方法二：可选择半数换液方式，弃去半数培养基后，将剩余细胞悬起，将细

胞悬液按1: 2到1: 3的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。

人非小细胞肺癌细胞

(NCI-H524)

细胞冻存：待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。悬浮细胞冻存时，应

将细胞收集，1000RPM条件下离心4分钟，少量保存上清液（防止细胞吸

走)，加入部分新鲜培养基，加入到冻存管中，在冻存管中加入10%DMSO

后进行冻存。

注意事项：

收到细胞后，若发现干冰己挥发干净、冻存管瓶盖脱落、破损及细胞有污染，请立

即与我们联系。

所有动物细胞均视为有潜在的生物危害性，必须在二级生物安全台内操作，并请注

意防护，所有废液及接触过此细胞的器皿需要灭菌后方能丢弃。