鸡淋巴瘤细胞
(DT40)
细胞介绍
DT40是来自HylineSC鸡法氏囊淋巴细胞株经鸟类白血病病毒诱导建株的。原始
淋巴瘤用罗氏相关病毒l(RAV-l)感染出生1天的小鸡得到。法氏囊中生成的肿瘤
制成细胞悬液后通过静脉注射输入同基因型的受体小鸡。经过一次体内移植后，
建立了 DT40细胞株。这株细胞包含的前病毒基因整合在c-myc原癌基因的上游，
表达的c-myc RNA水平较高。它缺少一个正常c-myc基因，但含有两个拷贝ALV
去调控的myc基因。这株细胞保留了重排免疫球蛋白轻链基因(IgL)的能力。在
IgL位点，DT40包含一个重排和一个胚系同源基因。c-rel基因和v-rel癌基因在
DT40细胞株中都能诱导组织相容性(MHC)II类抗原表达。v-rel诱导的MHCII表达
比c-rel诱导快，且其有效性在数周后达到c-rel的50倍。这株细胞呈淋巴母细胞
表型。传染性检测表明DT40释放低水平的传染性RAV-1。这株细胞可以用于稳
转研究。
细胞特性
1)来源：鸡淋巴瘤
2)形态：淋巴母细胞
3)含量：>lxl06 个/mL
4)污染：支原体、细菌、酵母和真菌检测为阴性
5)规格：T25瓶或者lmL冻存管包装
运输和保存：使用含有优质胎牛血清的2ml冻存管发送存活细胞。收到细胞后，
可在1000RPM，常温条件下，离心5min后，于洁净操作台弃去上清，加入推荐
使用的培养基后转移至l〇cm培养皿或者T25培养瓶中培养，传代达到细胞生长
状态良好时，再进行冻存。具体操作见细胞培养步骤。
细胞用途：仅供科研使用。
细胞培养步骤
1)培养基及培养冻存条件准备：
1. 准备 DMEM 培养基(DMEM，GIBCO,货号 11965-092)，85%;胎牛血清，10%，
鸡血清，5%。
2. 培养条件：气相：空气，95%;二氧化碳，5%。温度：37摄氏度，培养箱
湿度为70%-80%。
3.冻存液：90%完全培养基，10%DMSO,现用现配。液氮储存。
2)细胞处理：
复苏细胞：将含有lmL细胞悬液的冻存管在37°C水浴中迅速摇晃解冻，加
入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补
加l-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜（或将
细胞悬液加入l〇cm皿中，加入约8ml培养基，培养过夜）。第二天换液并检
查细胞密度。
细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
对于悬浮细胞，传代可参考以下方法：
方法一：收集细胞，1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加l-2mL
培养液后吹匀，将细胞悬液按1: 2到1: 5的比例分到新的含8ml培养基的
新皿中或者瓶中。
方法二：可选择半数换液方式，弃去半数培养基后，将剩余细胞悬起，将细
胞悬液按1: 2到1: 3的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
细胞冻存：待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。悬浮细胞冻存时，应
将细胞收集，1000RPM条件下离心4分钟，少量保存上清液（防止细胞吸
走)，加入部分新鲜培养基，加入到冻存管中，在冻存管中加入10%DMSO
后进行冻存。
注意事项：
收到细胞后，若发现干冰己挥发干净、冻存管瓶盖脱落、破损及细胞有污染，请立
即与我们联系。
所有动物细胞均视为有潜在的生物危害性，必须在二级生物安全台内操作，并请注
意防护，所有废液及接触过此细胞的器皿需要灭菌后方能丢弃。
