微量法:100T/96S
注 意:正式测定之前选择 2-3 个预期差异大的样本做预测定。
测定意义:
TPX 属于过氧化物酶家族,在体内主要通过还原过氧化氢和一些氢过氧化物来实现抗氧化作用,功能与 GPX 类似,也是谷胱甘肽氧化还原循环关键酶之一。TPX 普遍存在于各种生物体内,如酵母、植物、动物、原生动物、寄生虫、细菌和古细菌,在进化上高度保守。 TPX 与细胞增殖、分化、细胞凋亡及肿瘤发生调控密切相关。TPX 的主要功能包括细胞脱毒、抗氧化和调节由过氧化氢介导的信号转导和免疫反应。
测定原理:
TPX 催化 H2O2 氧化二硫苏糖醇(DTT),H2O2 的吸收波长为 240nm,通过测定 240nm 吸光度的下降速率,即可计算出 TPX 活性。
自备仪器和用品:
低温离心机、水浴锅、可调节移液器、紫外分光光度计/酶标仪、微量石英比色皿/96 孔板(UV板)、和蒸馏水