分光光度法:50管/48样
注 意:正式测定前务必取 2-3 个预期差异较大的样本做预测定
测定意义:
顺乌头酸酶(aconitase),三羧酸循环中的酶,催化柠檬酸转变为异柠檬酸。柠檬酸本身不易氧化,在顺乌头酸酶作用下,通过脱水与加水反应,使羟基由β碳原子转移到α碳原子上,生成易于脱氢氧化的异柠檬酸,为进一步的氧化脱羧反应作准备。
测定原理:
ACO 催化柠檬酸转化成异柠檬酸,异柠檬酸氧化脱羧将 NAD+ 还原生成 NADH,导致 340nm 处光吸收上升。
需自备的仪器和用品:
紫外分光光度计、水浴锅、台式离心机、可调式移液器、1mL 石英比色皿、研钵、冰和蒸馏水。