微量法:100T/96S
测定意义
辅酶A是生物体内转酰酶和α-酮戊二酸脱氢酶的辅酶,对糖的分解、脂肪酸的合成和分解、氨基酸的代谢等多种生化反应起重要作用。辅酶A在临床上主要用于脂类代谢异常引起的疾病和其他疾病的辅助治疗。
测定原理
α-酮戊二酸脱氢酶可催化辅酶A、α-酮戊二酸和NAD+生成琥珀酰辅酶A、 二氧化碳和 NADH,NADH在340 nm有特征吸收峰,在反应体系中加入α-KGDH、α-酮戊二酸和NAD+,辅酶A含量和NADH的生成速率成正比。
需自备的仪器和用品
紫外分光光度计/酶标仪、水浴锅、台式离心机、可调式移液器、微量石英比色皿/96孔板、研钵、冰和蒸馏水。