微量法:100管/96样
注 意:正式测定前务必取 2-3 个预期差异较大的样本做预测定
测定意义:
蔗糖是大多数高等植物从源到库运输的主要形式, 但进入库器官后被分解为果糖和葡萄糖,果糖在进入下一步代谢前必须由果糖激酶或己糖激酶进行磷酸化,以帮助库组织的建立和库强的提高。果糖激酶是催化果糖磷酸化的主要酶,还可以作为植物的己糖感受器和信号分子,通过影响植物的生长周期来调控植物的代谢和生长发育进程,在库组织中发挥重要的作用。因此,研究果糖激酶对研究植物中果糖代谢调节机制具有十分重要的意义。
测定原理:
FRK 催化果糖合成 6-磷酸果糖,6-磷酸果糖在磷酸己糖异构酶的作用下异构为 6-磷酸葡萄糖,6-磷酸葡萄糖脱氢酶进一步催化 6-磷酸葡萄糖脱氢生成 NADH,NADH 在 340nm 有特征吸收峰。
需自备的仪器和用品:
酶标仪、恒温水浴锅、台式离心机、可调式移液器、96 孔板、研钵、冰和蒸馏水。