微量法:100T/96S
注 意:正式测定之前选择 2-3 个预期差异大的样本做预测定。
测定意义:
植物细胞壁中的果胶是植物初生细胞壁的主要成分,除了起结构支撑、物质运输等作用外,还具有抵抗逆境的作用。果胶甲酯化程度影响了细胞壁的坚韧程度及其抗性。
测定原理:
果胶甲酯键经皂化处理后释放出甲醇,甲醇与 2,4-戊二酮反应显色,在 412nm 下测定吸光值;同时半乳糖醛酸在 70℃下与浓硫酸反应生成 5-甲酰基-2-呋喃甲酸,5-甲酰基-2-呋喃甲酸与 3,5-二甲基苯酚反应产生有色物质,在 450nm 下有最大吸光值。以甲醇生成量与半乳糖醛酸含量的比值代表果胶甲酯化程度。
自备实验用品及仪器:
天平、低温离心机、酶标仪、96 孔板、恒温水浴锅、蒸馏水、硫酸。