丙氨酸氨基转移酶(谷丙转氨酶/ALT/GPT)测试盒

丙氨酸氨基转移酶(谷丙转氨酶/ALT/GPT)测试盒

一、测定原理：

谷丙转氨酶（ALT）在 37℃及 PH7.4 条件下，作用于丙氨酸及α-酮戊二酸组成的底物，生成丙酮酸及谷氨酸。反应 30min 后（固定时间）加入 2，4-二硝基苯肼（DNPH）盐酸溶液，既中止反应，同时 DNPH 与酮酸中羰基加成，生成丙酮酸苯腙。苯腙在碱性条件下呈红棕色，于 505nm 比读吸光度并计算酶活力。

二、试剂的组成与配制：

试剂一：谷丙转氨酶基质液,50ml×1 瓶，4℃冰箱保存 6 个月；

试剂二：显色液，50ml×1 瓶，4℃冰箱保存 6 个月；

试剂三：浓缩终止液，50ml×1 瓶，室温密封保存 6 个月；

应用终止液的配制：临用时按浓缩终止液:双蒸水=1：9 的比例稀释，室温密封保存。

试剂四：2mol/ml 标准液 1 支，4℃冰箱保存 6 个月；

试剂五：0.1mol/L 缓冲液 1 支，4℃冰箱保存 6 个月。

三、操作过程：

1、样本前处理：样本处理详见说明书或本公司官网-技术文章部分关于样本处理的说明。测定组织和细胞同时需要测定蛋白浓度。可用总蛋白定量测试盒（考马斯亮蓝法）或者总蛋白定量测试盒(BCA 法)进行蛋白浓度的测定。