活性氧(ROS)测试盒(化学荧光法)
一、测定原理:
本试剂盒采用的 DCFH-DA(2,7-Dichlorofuorescin Diacetate)探针,是迄今最常用、最灵敏的细胞内活性氧检测探针。DCFH-DA 本身没有荧光,可以自由穿过细胞膜,当其进入细胞内后,会被细胞内的相关酯酶水解为 DCFH(Dichlorofluorescin)。而 DCFH 不能通透细胞膜,从而使探针很容易被标记到细胞内。当细胞内有活性氧存在时,DCFH 被氧化为强绿色荧光物质 DCF(Dichlorofluorescein),其荧光在激发波长 502nm,发射波长 530nm 附近有最大波峰,其荧光强度与细胞内活性氧水平成正比。
二、试剂组成及保存:
1、0.1ml 10mM DCFH-DA in DMSO,20℃保存。
2、1ml 活性氧供氢体,4-8℃保存。
三、组织样本操作步骤:
(可用激光共聚焦显微镜观察,也可用于流式细胞仪、荧光酶标仪、荧光分光度计测定)