β-N-乙酰氨基葡萄糖苷酶(NAG)测试盒
一、测定原理:
β-N-乙酰氨基葡萄糖苷酶(β-N-Acetylglucosaminidase,NAG)广泛存在于各种组织器官、体液、红细胞、白细胞及血小板中,是溶酶体中的一种酸性水解酶。底物在 NAG 作用下水解,释放出游离的对硝基酚。加入碱性溶液停止反应,并使对硝基酚显色。在400nm处测吸光度,可计算酶活力单位。
二、试剂组成及配制:
试剂一:溶液 40ml×1 瓶。
试剂二:底物,粉剂×1 支。
试剂三:终止剂 60ml×2 瓶。
试剂四:液体 6ml×1 瓶。(天冷会有结晶析出,测试前置于 37℃水浴直至透亮)
试剂五:3mmol/L 对硝基酚标准贮备液 2ml×1 瓶。0.6mmol/L 对硝基酚标准应用液的配制:3mmol/L 对硝基酚标准贮备液作 5 倍稀释,即3mmol/L 对硝基酚∶双蒸水=1∶4 稀释。底物缓冲液的配制:底物溶解度小,配制底物溶液时,应先用适量试剂一将试剂二粉剂 1支调成糊状,再边搅拌边逐渐加试剂一到 30ml,混匀至完全溶解(不可加热)。配好后的底物缓冲液为过饱和溶液,如有结晶,可静置或离心后取上清进行检测。用不完的底物缓冲液 4℃可保存两个月以上。