总一氧化氮合成酶(NOS)分型测试盒

一、测定原理：

NOS 催化 L-Arg 和分子氧反应生成 NO，NO 与亲核性物质生成有色化合物，在 530nm 波长下测定吸光度，根据吸光度的大小可计算出 NOS 活力。

NOS 主要有两种类型：即结构型(cNOS)和诱导型(iNOS)。结构型(cNOS)主要存在于神经元和内皮细胞内，依赖钙；诱导型(iNOS)主要存在于巨噬细胞内，不依赖钙。根据此原理可以分型。

二、试剂组成与配制：

试剂一：底物缓冲液 6ml2 瓶，-20ºC 以下避光冷冻保存 3 个月。临用前化冻摇匀。没有用完的试剂，可以-20ºC 以下避光冷冻保存以备下次再用。

试剂二：促进剂淡黄色或白色粉剂3 支，稀释液 0.6 ml3 支。-20ºC 以下冷冻保存 6 个月。测试前取稀释液一支 0.6ml 加入一支粉剂中充分混匀（即将 1.5ml 小离心管反复颠倒，并将小离心管尖部的液体弹下来），测试后剩余试剂可放入-20ºC 以下冷冻保存，时间不超过一周。若发现粉剂变成黄褐色或咖啡色，则不可以再用。

试剂三：显色剂（黄色）6ml1 瓶，4ºC 避光冷藏保存 3 个月。

试剂四：透明剂 6ml1 瓶，室温保存 6 个月。天冷后会凝固，37℃水浴变澄清时再使用。试剂五：终止剂 60ml2 瓶，4ºC 保存 6 个月。室温低会出现浑浊，37℃水浴至透明再用。试剂六：液体 10ml×1 瓶，4℃保存 6 个月。用前请仔细观察，如有结晶附着在瓶壁或瓶底，可将试剂连同瓶子一起在 90～100℃热水中摇晃等其完全溶解后，即可使用。