293T/17人胚肾细胞
基本信息
产品品牌 ：酶联生物
中文名称 ：人胚肾细胞
细胞简称 ：293T /17
细胞别称 ：HEK 293T /17;293T /17
细胞形态 ：上皮细胞样
生长特性 ：贴壁细胞
培养环境 ：空气，95% ；CO2，5% 37℃
冻存条件 ：55% 基础培养基+40% FBS+5% D M SO液氮
完全培养基 ：DM EM (PM 150210)＋10% F B S(164210-50)＋1% P /S(P B 180120)
传代步骤
1、吸出原培养液。
2、加入2ml左右PBS，轻轻晃动培养瓶润洗细胞,吸出PBS丢弃。
3、加入1ml左右0.25% 胰蛋白酶溶液（含ED TA ），轻轻晃动培养瓶使之浸润所有细胞。
4、放入培养箱消化，显微镜下看到细胞块中间的细胞明显变圆有间隙时可终止，全程不要拍打培养瓶。
5、加入3ml含血清的培养基终止消化，吹打细胞使之脱壁并在液体里反复吹打使细胞尽量呈单颗细胞的悬浮液。
6、收集细胞悬液离心，1200rpm /min 3分钟，离心完吸出上清丢弃。
7、加入新鲜培养基，吹打几下混匀细胞即可，按比例接种到新培养瓶，补足培养基，拧松瓶盖或使用透气瓶盖进行培养。
消化时间 ：0.5~ 1分钟
传代比例（密度） ：1:3-1:4
换液频次 ：2~ 3次/周
收货注意事项
若收到细胞大片脱落，请按照如下处理方式处理：
1、将培养瓶内所有培养基 转入无菌离心管，离心收集细胞（1200rpm 3min）去除旧培养基。
2、用 PBS 重悬细胞，将所有细胞收集到一个离心管中，再次离心（1200rp m 3min）去除PBS。
3、加入1ml左右0.25% 胰酶重悬细胞，混匀即可，不能吹打太多次，放入培养箱消化3分钟。
4、消化好后，用移液枪轻轻吹打细胞悬液，使细胞团分散，迅速加入3-5ml含血清的培养基混匀以终止消化，离心（1200rpm3min）去除胰酶。
5、加入5ml左右的细胞相应的完全培养基混匀，按比例接入无菌培养瓶/皿中（首次传代推荐1:3）。
细胞背景描述
293T /17细胞株是293T 细胞株的衍生株，293T 是293 [H EK -293]细胞株插入了SV 40 T-antigen的温度敏感基因形成的高转衍生株。293T细胞进行克隆，检测pBN D 和pZ A P载体，得到一株能生成高滴度感染逆转录病毒的衍生株293T /17细胞。293T /17细胞持续表达猿病毒40(SV 40)大T 抗原，而因其高转染能力筛选到17号克隆。293T /17细胞用pC RIPenv-和pC RIPgag-2载体转染得到A N JO U 65细胞株，A N JO U 65细胞再用pC R IPgag-2和pG PT 2E载体转染得到亲宅性外壳表达细胞株BO SC 23。A N JO U 65细胞用携带gpt抗性基因的pC RIPA M gag载体转染得到Bing双向性表达包装细胞株。
供体年龄 ：胚胎
组织来源 ：肾
细胞类型 ：转化细胞系
生物安全等级 ：2
细胞保藏中心 ：ATCC ; C R L-11268
收到常温细胞后如何处理
细胞培养详细操作步骤请参照酶联生物细胞培养操作指南
1. 收到常温细胞后，及时拍照记录有无漏液/瓶身破损现象。
2. 用75%酒精擦拭细胞培养瓶表面，显微镜下观察细胞状态。先不要打开培养瓶盖，将细
胞置于细胞培养箱内静置培养2-4小时，以便稳定细胞状态。
3. 仔细阅读细胞说明书，了解细胞相关信息，如贴壁特性（贴壁/悬浮）、细胞形态、所用
基础培养基、血清比例、所需细胞因子、传代比例、换液频率等。
4. 静置完成后，取出细胞培养瓶，镜检、拍照，记录细胞状态（所拍照片 将作为后续服务
依据）；建议细胞传代培养后，定期拍照、记录细胞生长状态。
5. 若观察到异常或者对细胞有疑问，请及时跟我们联系；对于细胞培养操作及培养。可跟我们的技术支持交流。
售前须知
该细胞贴壁松散，操作时请尽量轻柔；换液时需预热培养基；收货如有大块脱落的细胞
团，为正常现象，请按照收货注意事项处理。
