LWnt-3A小鼠皮下结缔组织细胞

基本信息

产品品牌 ：酶联生物

中文名称 ：小鼠皮下结缔组织细胞

细胞简称 ： LW n t-3A

细胞形态 ： 成纤维细胞样

生长特性 ： 贴壁细胞

培养环境 ： 空气，95% ；CO2，5% 37℃

冻存条件 ： 55% 基础培养基+40% FBS+5% D M SO液氮

完全培养基 ： DM EM (PM 150210)＋0.4m g/mlG 418(PB 180125)＋10%F B S(164210-50)＋1% P /S(P B 180120)

传代步骤

1、吸出原培养液。

2、加入2ml左右PBS，轻轻晃动培养瓶润洗细胞,吸出PBS丢弃。

3、加入1ml左右0.25% 胰蛋白酶溶液（含ED TA ），轻轻晃动培养瓶使之浸润所有细胞。

4、放入培养箱消化，显微镜下看到细胞块中间的细胞明显变圆有间隙时可终止，全程不要拍打培养瓶。

5、加入3ml含血清的培养基终止消化，吹打细胞使之脱壁并在液体里反复吹打使细胞尽量呈单颗细胞的悬浮液。

6、收集细胞悬液离心，1200rpm /min 3分钟，离心完吸出上清丢弃。

7、加入新鲜培养基，吹打几下混匀细胞即可，按比例接种到新培养瓶，补足培养基，拧松瓶盖或使用透气瓶盖进行培养。

消化时间 ： 2~ 3分钟

传代比例（密度） ： 1:3-1:4

换液频次 ： 2~ 3次/周

细胞背景描述

LW nt-3A 细胞是由L-M (T K -)细胞用W nt-3A 表达载体转染并在含G 418的培养基中筛选出的稳转株。W nt-3A 基因编码一个有变异的信号功效分泌性糖蛋白，W nt基因控制胚胎发过程中的许多模式形成和生长事件。L W nt-3A 细胞分泌有生物活性的W nt-3A 蛋白，L W nt-3A 细胞是目前生产W nt-3A 条件培养基的最好来源。由于这种条件培养基还包含W nt-3A 蛋白外的其他因子，对于涉及W nt-3A 条件培养基的实验有必要用其来源细胞株作对照。

供体年龄 ： 雄性，100日龄

组织来源 ： 组织：皮下结缔组织；疏松结缔组织及脂肪；品系：C 3H /A n

细胞类型 ： 自发永生化细胞

生物安全等级 ： 1

基因表达 ： W n t-3A

细胞保藏中心 ： ATCC  ;  C R L-2647

收到常温细胞后如何处理

细胞培养详细操作步骤请参照酶联生物细胞培养操作指南

1. 收到常温细胞后，及时拍照记录有无漏液/瓶身破损现象。

2. 用75%酒精擦拭细胞培养瓶表面，显微镜下观察细胞状态。先不要打开培养瓶盖，将细胞置于细胞培养箱内静置培养2-4小时，以便稳定细胞状态。

3. 仔细阅读细胞说明书，了解细胞相关信息，如贴壁特性（贴壁/悬浮）、细胞形态、所用基础培养基、血清比例、所需细胞因子、传代比例、换液频率等。

4. 静置完成后，取出细胞培养瓶，镜检、拍照，记录细胞状态（所拍照片 将作为后续服务依据）；建议细胞传代培养后，定期拍照、记录细胞生长状态。

5. 若观察到异常或者对细胞有疑问，请及时跟我们联系；对于细胞培养操作及培养。可跟我们的技术支持交流。