PA317小鼠成纤维细胞

基本信息

产品品牌 ：酶联生物

中文名称 ：小鼠成纤维细胞

细胞简称 ： PA 317

细胞形态 ： 成纤维细胞样

生长特性 ： 贴壁细胞

培养环境 ： 空气，95% ；CO2，5% 37℃

冻存条件 ： 55% 基础培养基+40% FBS+5% D M SO液氮

完全培养基 ： DM EM (PM 150210)＋10% F B S(164210-50)＋1% P /S(P B 180120)

传代步骤

1、吸出原培养液。

2、加入2ml左右PBS，轻轻晃动培养瓶润洗细胞,吸出PBS丢弃。

3、加入1ml左右0.25% 胰蛋白酶溶液（含ED TA ），轻轻晃动培养瓶使之浸润所有细胞。

4、放入培养箱消化，显微镜下看到细胞块中间的细胞明显变圆有间隙时可终止，全程不要拍打培养瓶。

5、加入3ml含血清的培养基终止消化，吹打细胞使之脱壁并在液体里反复吹打使细胞尽量呈单颗细胞的悬浮液。

6、收集细胞悬液离心，1200rpm /min 3分钟，离心完吸出上清丢弃。

7、加入新鲜培养基，吹打几下混匀细胞即可，按比例接种到新培养瓶，补足培养基，拧松瓶盖或使用透气瓶盖进行培养。

传代比例（密度） ： 1:3-1:4

换液频次 ： 2~ 3次/周

细胞背景描述

PA 317细胞源自TK -N IH /3T3细胞，通过pBR322中的包装结构D N A (pPAM 3)和pBR322中的单纯疱疹病毒胸苷激酶基因共同转染构建而成。通过感染或转染将逆转录病毒载体导入这些细胞，结果生成可以感染许多哺乳动物细胞的双嗜性载体颗粒。PA317细胞生成的病毒颗粒已成功地用于将基因导入人类，可能因为用于构建PA317细胞而转入的D N A 丢失，能够包装逆转录病毒载体的PA 317细胞百分比随传代而减少。在含0.03m M 次黄嘌呤、0.001m M 氨甲喋呤和0.02m M 胸苷的培养基中短暂(大约5天)选择，可以选出保留了包装功能的细胞。选择后，PA 317细胞应在H T培养基(0.03m M 次黄嘌呤、0.02m M 胸苷)中培养4天，以稀释残留的氨甲喋呤，此后PA317细胞不需选择可以稳定至少1个月。

供体年龄 ： 胚胎

组织来源 ： 胚胎

细胞类型 ： 转化细胞系

生物安全等级 ： 1

细胞保藏中心 ： ATCC ;  C RL-9078EC AC C ;  89032007

收到常温细胞后如何处理

细胞培养详细操作步骤请参照酶联生物细胞培养操作指南

1. 收到常温细胞后，及时拍照记录有无漏液/瓶身破损现象。

2. 用75%酒精擦拭细胞培养瓶表面，显微镜下观察细胞状态。先不要打开培养瓶盖，将细胞置于细胞培养箱内静置培养2-4小时，以便稳定细胞状态。

3. 仔细阅读细胞说明书，了解细胞相关信息，如贴壁特性（贴壁/悬浮）、细胞形态、所用

基础培养基、血清比例、所需细胞因子、传代比例、换液频率等。

4. 静置完成后，取出细胞培养瓶，镜检、拍照，记录细胞状态（所拍照片 将作为后续服务依据）；建议细胞传代培养后，定期拍照、记录细胞生长状态。

5. 若观察到异常或者对细胞有疑问，请及时跟我们联系；对于细胞培养操作及培养。可跟我们的技术支持交流。