人外周血白细胞

产品名称 ：人外周血白细胞

产品品牌 ：酶联生物

组织来源 ：外周血

产品规格 ：5×105cells/T 25细胞培养瓶

细胞简介

人外周血白细胞分离自外周血。外周血是除骨髓之外的血液，临床上常用一些方法把骨髓中的造血干细胞释放到血液中，再在从血液中提取分离得到造血干细胞，我们把这样得到的干细胞称为外周血干细胞，在二十一世纪初人类开始的生命方舟计划中首次提出外周血这一新概念。白细胞(Leukocyte) ，旧称白血球，血液中的一类细胞。

根据白细胞的细胞质内有无特殊颗粒，可将其分为有粒白细胞和无粒白细胞。前者常简称为粒细胞，根据其特殊颗粒的染色特性，又分为中性粒细胞、嗜碱性粒细胞和嗜酸性粒细胞，白细胞也通常被称为免疫细胞。在显微镜下可以看到，血细胞中体积比较大、数量比较少，具有细胞核。其主要作用是吞噬细菌、防御疾病。

方法简介

酶联生物实验室分离的人外周血白细胞采用取外周血、通过密度梯度离心法制备而来，细胞总量约为5×105cells/瓶 。

质量检测

酶联生物实验室分离的人外周血白细胞经过检测，且不含有H IV -1、H BV 、H C V 、支原体、细菌、酵母和真菌等。

培养信息

培 养 基 ：含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptom ycin等

换液频率 ：每2-3天换液一次

生长特性 ：悬浮

细胞形态 ：圆形

传代特性 ：不增殖。不传代

传代比例 ：不传代

消 化  液 ：0. 25% 胰蛋白酶

培养条件 ：气相 ：空气，95% 。C O2，5%

人外周血白细胞体外培养周期有限。建议使用酶联生物配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养，以此保证该细胞的最佳培养状态。

细胞培养状态

发货时发送细胞电子版照片

使用方法

人外周血白细胞是一种悬浮细胞，细胞形态呈圆形，在酶联生物技术部标准操作流程下，细胞不增殖。不传代。建议您收到细胞后尽快进行相关实验。

客户收到细胞后，请按照以下方法进行操作

1. 取出T 25细胞培养瓶，用75% 酒精消毒瓶身，拆下封口膜，放入37℃、5% C O 2、饱和湿度的细胞培养箱中静置3-4h，以稳定细胞状态。

2. 悬浮细胞处理

1) 收集T25细胞培养瓶中的培养基至50ml离心管中，用PBS清洗细胞培养瓶1-2次，收集清洗液。

2) 1200-1500rpm 离心3min，弃上清，收集细胞沉淀。

3) 加入5ml新鲜完全培养基，用吸管轻轻吹打混匀、分散细胞。将分散好的细胞调整合适密度接种至培养器皿中，置于37℃、5% C O 2、饱和湿度的细胞培养箱中静置培养。

4) 若遇到悬浮细胞团块较大，无法机械吹散时，向步骤2) 中细胞沉淀添加0. 25% 胰蛋白酶消化液2m L至离心管中，用吸-管轻轻吹打混匀，37℃温浴2-3min，消化结束后，加入胰酶抑制剂(或血清) 终止消化，用吸管轻轻吹打，分散细胞。1200rpm 离心5min，弃上清，收集细胞沉淀。

5) 加入5ml新鲜完全培养基，用吸管轻轻吹打混匀。按传代比例进行接种传代，然后补充新鲜的完全培养基至5m L，置于37℃、5% C O 2、饱和湿度的细胞培养箱中静置培养。

6) 待细胞状态稳定后，培养观察。之后按照换液频率更换新鲜的完全培养基。

注意事项

1. 培养基于4℃条件下可保存3-6个月。

2. 在细胞培养过程中，请注意保持无菌操作。

3. 传代培养过程中，胰酶消化时间不宜过长，否则会影响细胞贴壁及其生长状态。

4. 建议客户收到细胞后前3天每个倍数各拍几张细胞照片，记录细胞状态，便于和酶联生物技术部沟通。由于运输的原因，个别敏感细胞会出现不稳定的情况，请及时和我们联系，详尽告知细胞的具体情况，以便我们的技术人员跟踪、回访直至问题得到解决。

特殊注意事项

此细胞为悬浮细胞，请注意不要直接倒掉，造成损失。悬浮细胞因多数胞体较小，离心收集时，请注意悬液中细胞是否收集完全，可适当加大离心转速200转或增加离心时间3-5m in，增加细胞获取量。