大鼠脾淋巴细胞

产品名称 ：大鼠脾淋巴细胞

产品品牌 ：酶联生物

组织来源 ：脾脏

产品规格 ：5×105cells/T 25细胞培养瓶

细胞简介

大鼠脾淋巴细胞分离自脾脏组织。脾脏是机体最大的免疫器官，占全身淋巴组织总量的25% ，含有大量的淋巴细胞和巨噬细胞，是机体细胞免疫和体液免疫的中心。位于左季肋区后外方肋弓深处，与9－11肋相对，长轴与第10肋一致。膈面与膈肌和左肋膈窦相邻，前方有胃，后方与左肾、左肾上腺毗邻，下端与结肠脾沟相邻，地柔软的网状内皮细胞器官。

淋巴细胞(lym phocyte) 白细胞的一种，由淋巴器官产生，机体免疫应答功能的重要细胞成分。淋巴器官根据其发生和功能的差异，可分为中枢淋巴器官(又名初级淋巴器官) 和周围淋巴器官(又名次级淋巴器官) 两类。前者包括胸腺、腔上囊或其相当器官(有人认为在哺乳动物是骨髓) 。它们无须抗原刺激即可不断增殖淋巴细胞，成熟后将其转送至周围淋巴器官。后者包括脾、淋巴结等。成熟淋巴细胞需依赖抗原刺激而分化增殖，继而发挥其免疫功能。

方法简介

酶联生物实验室分离的大鼠脾淋巴细胞采用机械研磨法结合密度梯度离心法制备而来，细胞总量约为1×10cells/瓶。

质量检测

酶联生物实验室分离的大鼠脾淋巴细胞经过检测，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。

培养信息

培 养 基 ：含FBS、生长添加剂、P enicillin、Streptom ycin等

换液频率 ：每 2-3天换液一次

生长特性 ：悬浮

细胞形态 ：圆形

传代特性 ：不增殖。不传代

传代比例 ：不传代

消 化 液 ：0. 25% 胰蛋白酶

培养条件 ：气相 ：空气，95% 。C O2，5%

大鼠脾淋巴细胞体外培养周期有限。建议使用酶联生物配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养，以此保证该细胞的最佳培养状态。

细胞培养状态

发货时发送细胞电子版照片

使用方法

大鼠脾淋巴细胞是一种悬浮细胞，细胞形态呈圆形，在酶联生物技术部标准操作流程下，细胞不增殖。不传代。建议您收到细胞后尽快进行相关实验。

客户收到细胞后，请按照以下方法进行操作

1. 取出T 25细胞培养瓶，用75% 酒精消毒瓶身，拆下封口膜，放入37℃、5% C O 2、饱和湿度的细胞培养箱中静置3-4h，以稳定细胞状态。

2. 悬浮细胞处理

1) 收集T25细胞培养瓶中的培养基至50ml离心管中，用PBS清洗细胞培养瓶1-2次，收集清洗液。

2) 1200-1500rpm 离心3min，弃上清，收集细胞沉淀。

3) 加入5ml新鲜完全培养基，用吸管轻轻吹打混匀、分散细胞。将分散好的细胞调整合适密度接种至培养器皿中，置于37℃、5% C O 2、饱和湿度的细胞培养箱中静置培养。

4) 若遇到悬浮细胞团块较大，无法机械吹散时，向步骤2) 中细胞沉淀添加0. 25% 胰蛋白酶消化液2m L至离心管中，用吸-管轻轻吹打混匀，37℃温浴2-3min，消化结束后，加入胰酶抑制剂(或血清) 终止消化，用吸管轻轻吹打，分散细胞。1200rpm 离心5min，弃上清，收集细胞沉淀。

5) 加入5ml新鲜完全培养基，用吸管轻轻吹打混匀。按传代比例进行接种传代，然后补充新鲜的完全培养基至5m L，置于37℃、5% C O 2、饱和湿度的细胞培养箱中静置培养。

6)待细胞状态稳定后，培养观察。之后按照换液频率更换新鲜的完全培养基。

注意事项

1. 培养基于4℃条件下可保存3-6个月。

2. 在细胞培养过程中，请注意保持无菌操作。

3. 传代培养过程中，胰酶消化时间不宜过长，否则会影响细胞贴壁及其生长状态。

4. 建议客户收到细胞后前3天每个倍数各拍几张细胞照片，记录细胞状态，便于和酶联生物技术部沟通。由于运输的原因，个别敏感细胞会出现不稳定的情况，请及时和我们联系，详尽告知细胞的具体情况，以便我们的技术人员跟踪、回访直至问题得到解决。

特殊注意事项

5. 此细胞为悬浮细胞，请注意不要直接倒掉，造成损失。悬浮细胞因多数胞体较小，离心收集时，请注意悬液中细胞是否收集完全，可适当加大离心转速200转或增加离心时间3-5m in，增加细胞获取量。