产品名称 : 大鼠肠神经嵴干细胞
产品品牌 : 酶联生物
组织来源 : 肠组织
产品规格 : 5×105cells/T 25细胞培养瓶
细胞简介
大鼠肠神经嵴干细胞分离自肠组织;神经嵴干细胞(neuralcrest stem cells,N C SC ),即外周神经系统干细胞,起源于胚胎期的神经管背侧,与中枢神经系统干细胞在形态学上有着显著不同,N C SC 可表达低亲和力神经营养因子受体p75N T R 而不能分化出少突胶质细胞,而中枢神经系统干细胞与之恰好相反。N C SC 可在不同部位分化出多种组织,如神经元、神经胶质、黑色素细胞、内分泌细胞、平滑肌、骨骼肌及骨等,其中可特异性分化出肠神经系统中神经元和神经胶质的N C SC ,被称为肠神经嵴干细胞(gutneuralcrest stemcells,G N CSC)。
方法简介
酶联生物实验室分离的大鼠肠神经嵴干细胞采用中性蛋白酶-胶原酶联合消化法制备而来,细胞总量约为5×105cells/瓶 。
质量检测
酶联生物实验室分离的大鼠肠神经嵴干细胞经N estin免疫荧光鉴定,纯度可达90% 以上,且不含有H IV -1、H BV 、H C V 、支原体、细菌、酵母和真菌等。
培养信息
培 养 基 : 含B-27 Supplem ent、EG F、bFG F、Penicillin、Streptom ycin等
换液频率 : 每2-3天换液一次
生长特性 : 悬浮
细胞形态 : 球形
传代特性 : 可传1-3代左右;3代以内状态最佳
传代比例 : 1:2
消 化 液 : 0.25% 胰蛋白酶
培养条件 : 气相:空气,95% ;C O2,5%
大鼠肠神经嵴干细胞体外培养周期有限;建议使用酶联生物配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养,以此保证该细胞的最佳培养状态。
细胞培养状态
发货时发送细胞电子版照片
使用方法
大鼠肠神经嵴干细胞是一种悬浮细胞,细胞形态呈球形,在酶联生物技术部标准操作流程下,细胞可传1-3代左右;3代以内状态最佳;建议您收到细胞后尽快进行相关实验。
客户收到细胞后,请按照以下方法进行操作
1.取出T 25细胞培养瓶,用75% 酒精消毒瓶身,拆下封口膜,放入37℃、5% C O 2、饱和湿度的细胞培养箱中静置3-4h,以稳定细胞状态。
2.悬浮细胞处理
1) 收集T25细胞培养瓶中的培养基至50ml离心管中,用PBS清洗细胞培养瓶1-2次,收集清洗液。
2)1200-1500rpm 离心3min,弃上清,收集细胞沉淀。
3)加入5ml新鲜完全培养基,用吸管轻轻吹打混匀、分散细胞;将分散好的细胞调整合适密度接种至培养器皿中,置于37℃、5% C O 2、饱和湿度的细胞培养箱中静置培养。
4)若遇到悬浮细胞团块较大,无法机械吹散时,向步骤2)中细胞沉淀添加0.25% 胰蛋白酶消化液2m L至离心管中,用吸-管轻轻吹打混匀,37℃温浴2-3min,消化结束后,加入胰酶抑制剂(或血清)终止消化,用吸管轻轻吹打,分散细胞;1200rpm 离心5min,弃上清,收集细胞沉淀。
5)加入5ml新鲜完全培养基,用吸管轻轻吹打混匀;按传代比例进行接种传代,然后补充新鲜的完全培养基至5m L,置于37℃、5% C O 2、饱和湿度的细胞培养箱中静置培养。
6)待细胞状态稳定后,培养观察;之后按照换液频率更换新鲜的完全培养基。
注意事项
1. 培养基于4℃条件下可保存3-6个月。
2. 在细胞培养过程中,请注意保持无菌操作。
3. 传代培养过程中,胰酶消化时间不宜过长,否则会影响细胞贴壁及其生长状态。
4. 建议客户收到细胞后前3天每个倍数各拍几张细胞照片,记录细胞状态,便于和酶联生物技术部沟通。由于运输的原因,个别敏感细胞会出现不稳定的情况,请及时和我们联系,详尽告知细胞的具体情况,以便我们的技术人员跟踪、回访直至问题得到解决。