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大鼠口腔上皮细胞

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产品名称 : 大鼠口腔上皮细胞
产品品牌 : 酶联生物
组织来源 : 口腔黏膜组织
产品规格 : 5×105cells/T 25细胞培养瓶

细胞简介
大鼠口腔上皮细胞分离自口腔黏膜组织;口腔上皮细胞是一种上皮细胞,呈扁平、多边形,形状不规则。口腔各壁都有黏膜覆盖,口腔上皮细胞主要分布在口腔两侧颊部。上皮的垂直切面上,细胞形状不一。紧靠基膜的一层基底细胞为矮柱状,为具有增殖分化能力的干细胞,部分子细胞向浅层移动。基底层以上是数层多边形细胞,再上为几层梭形或扁平细胞。仅靠近表面几层细胞为扁平状,基底层细胞能不断分裂增生,以补充表层衰老或损伤脱落的细胞。复层扁平上皮深层的结缔组织内有丰富的毛细血管,有利于复层扁平上皮的营养。

方法简介
酶联生物实验室分离的大鼠口腔上皮细胞先中性蛋白酶消化、后胰蛋白酶-胶原酶混合消化法制备而来,细胞总量约为5×105cells/瓶 。

质量检测
酶联生物实验室分离的大鼠口腔上皮细胞经C ytokeratin-18免疫荧光鉴定,纯度可达90% 以上,且不含有H IV -1、H BV 、H C V 、支原体、细菌、酵母和真菌等。

培养信息
包被条件 :  鼠尾胶原Ⅰ(2-5μg/cm 2)
培 养  基 :  含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptom ycin等
换液频率 :  每2-3天换液一次
生长特性 :   贴壁
细胞形态 :   上皮细胞样
传代特性 :   可传1-2代
传代比例 :  1:2
消 化  液 :  0.25% 胰蛋白酶
培养条件 :  气相:空气,95% ;C O2,5%

大鼠口腔上皮细胞体外培养周期有限;建议使用酶联生物配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养,以此保证该细胞的最佳培养状态。

细胞培养状态
发货时发送细胞电子版照片

使用方法
大鼠口腔上皮细胞是一种贴壁细胞,细胞形态呈上皮细胞样,在酶联生物技术部标准操作流程下,细胞可传1-2代;建议您收到细胞后尽快进行相关实验。

客户收到细胞后,请按照以下方法进行操作
1. 取出T 25细胞培养瓶,用75% 酒精消毒瓶身,拆下封口膜,放入37℃、5% C O 2、饱和湿度的细胞培养箱中静置3-4h,以稳定细胞状态。
2. 贴壁细胞消化
1) 吸出T25细胞培养瓶中的培养基,用PBS清洗细胞一次。
2) 添加0.25% 胰蛋白酶消化液1m L至T 25培养瓶中,轻微转动培养瓶至消化液覆盖整个培养瓶底后,吸出多余胰蛋白酶消化液,37℃温浴1-3min;倒置显微镜下观察,待细胞回缩变圆后,再加入5ml完全培养基终止消化。
3) 用吸管轻轻吹打混匀,按传代比例接种T25培养瓶传代,然后补充新鲜的完全培养基至5m L,置于37℃、5% C O 2、饱和湿度的细胞培养箱中静置培养;4)待细胞完全贴壁后,培养观察;之后按照换液频率更换新鲜的完全培养基。
3. 细胞实验
因原代细胞贴壁特殊性,贴壁的原代细胞在消化后转移至其他实验器皿(如玻璃爬片、培养板、共聚焦培养皿等)时,需要对实验器皿进行包被,以增强细胞贴壁性,避免细胞因没贴好影响实验;包被条件常选用鼠尾胶原Ⅰ(2-5μg/cm2) ,多聚赖氨酸PLL(0.1m g/m l),明胶(0.1% ),依据细胞种类而定。悬浮/半悬浮细胞无需包被。

注意事项
1. 培养基于4℃条件下可保存3-6个月。
2. 在细胞培养过程中,请注意保持无菌操作。
3. 传代培养过程中,胰酶消化时间不宜过长,否则会影响细胞贴壁及其生长状态。
4. 建议客户收到细胞后前3天每个倍数各拍几张细胞照片,记录细胞状态,便于和酶联生物技术部沟通。由于运输的原因,个别敏感细胞会出现不稳定的情况,请及时和我们联系,详尽告知细胞的具体情况,以便我们的技术人员跟踪、回访直至问题得到解决。
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