人源NK细胞

产品名称 ：人源NK细胞

产品品牌 ：酶联生物

组织来源 ：外周血

产品规格 ：5×105cells/T 25细胞培养瓶

细胞简介

人NK细胞分离自人外周血单个核细胞。NK细胞即自然杀伤细胞(naturalkillercell，NK) 是机体重要的免疫细胞，不仅与抗肿瘤、 抗病毒感染和免疫调节有关，而且在某些情况下参与超敏反应和自身免疫性疾病的发生，能够识别靶细胞、杀伤介质。NK细胞来源于骨髓淋巴样干细胞，其分化、发育依赖于骨髓及胸腺微环境，主要分布于骨髓、外周血、肝、脾、肺和淋巴结。

NK细胞不同于T 、B细胞，是一类无需预先致敏就能非特异性杀伤肿瘤细胞和病毒感染细胞的淋巴细胞。由于NK细胞的杀伤活性无M H C限制，不依赖抗体，因此称为自然杀伤活性。NK细胞胞浆丰富，含有较大的嗜天青颗粒，颗粒的含量与NK细胞的杀伤活性呈正相关。NK细胞作用于靶细胞后杀伤作用出现早，在体外1小时、体内4小时即可见到杀伤效应。NK细胞的靶细胞主要有某些肿瘤细胞(包括部分细胞系) 、病毒感染细胞、某些自身组织细胞(如血细胞) 、寄生虫等，因此NK细胞是机体抗肿瘤、抗感染的重要免疫因素，也参与第Ⅱ型超敏反应和移植物抗宿主反应。

方法简介

酶联生物实验室分离的人外周血NK细胞采用取外周血、通过密度梯度离心、差速贴壁、细胞因子诱导法制备而来，细胞总量约为5×105cells/瓶。

质量检测

酶联生物实验室分离的人源NK细胞经C D 56免疫荧光鉴定，纯度可达90% 以上，且不含有H IV -1、H BV 、H C V 、支原体、细菌、酵母和真菌等。

培养信息

培 养  基 ：含IL -2、IL -15、P enicillin、Streptom ycin等

换液频率 ：每2-3天换液一次

生长特性 ：悬浮

细胞形态 ：短梭形

传代特性 ：可传5代左右。3代以内状态最佳

传代比例 ：1:2

消 化  液 ：0. 25% 胰蛋白酶

培养条件 ：气相：空气，95% 。C O2，5%

人源NK细胞体外培养周期有限。建议使用酶联生物配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养，以此保证该细胞的最佳培养状态。

细胞培养状态

发货时发送细胞电子版照片

使用方法

人源NK细胞是一种悬浮细胞，细胞形态呈短梭形，在酶联生物技术部标准操作流程下，细胞可传5代左右。3代以内状态最佳。建议您收到细胞后尽快进行相关实验。

客户收到细胞后，请按照以下方法进行操作

1. 取出T 25细胞培养瓶，用75% 酒精消毒瓶身，拆下封口膜，放入37℃、5% C O 2、饱和湿度的细胞培养箱中静置3-4h，以稳定细胞状态。

2. 悬浮细胞处理

1) 收集T25细胞培养瓶中的培养基至50ml离心管中，用PBS清洗细胞培养瓶1-2次，收集清洗液。

2) 1200-1500rpm 离心3min，弃上清，收集细胞沉淀。

3) 加入5ml新鲜完全培养基，用吸管轻轻吹打混匀、分散细胞。将分散好的细胞调整合适

密度接种至培养器皿中，置于37℃、5% C O 2、饱和湿度的细胞培养箱中静置培养。

4) 若遇到悬浮细胞团块较大，无法机械吹散时，向步骤2) 中细胞沉淀添加0. 25% 胰蛋白酶消化液2m L至离心管中，用吸-管轻轻吹打混匀，37℃温浴2-3min，消化结束后，加入胰酶抑制剂(或血清) 终止消化，用吸管轻轻吹打，分散细胞。1200rpm 离心5min，弃上清，收集细胞沉淀。

5) 加入5ml新鲜完全培养基，用吸管轻轻吹打混匀。按传代比例进行接种传代，然后补充新鲜的完全培养基至5m L，置于37℃、5% C O 2、饱和湿度的细胞培养箱中静置培养。

6) 待细胞状态稳定后，培养观察。之后按照换液频率更换新鲜的完全培养基。

注意事项

1. 培养基于4℃条件下可保存3-6个月。

2. 在细胞培养过程中，请注意保持无菌操作。

3. 传代培养过程中，胰酶消化时间不宜过长，否则会影响细胞贴壁及其生长状态。

4. 建议客户收到细胞后前3天每个倍数各拍几张细胞照片，记录细胞状态，便于和酶联生物技术部沟通。由于运输的原因，个别敏感细胞会出现不稳定的情况，请及时和我们联系，详尽告知细胞的具体情况，以便我们的技术人员跟踪、回访直至问题得到解决。

特殊注意事项

5. 此细胞为悬浮细胞，请注意不要直接倒掉，造成损失。悬浮细胞因多数胞体较小，离心收集时，请注意悬液中细胞是否收集完全，可适当加大离心转速200转或增加离心时间3-5m in，增加细胞获取量。