产品名称 :人卵巢颗粒细胞
产品品牌 :酶联生物
组织来源 :卵巢组织
产品规格 :5×105cells/T 25细胞培养瓶
细胞简介
人卵巢颗粒细胞分离自卵巢组织。卵巢是雌性动物的生殖器官,卵巢的功能是产生卵以及类固醇激素。卵巢的位置与睾丸相同,仅左侧发育(右侧已退化) ,呈葡萄状,均为处于不同发育时期的卵泡,卵泡呈黄色,卵巢表面密布血管。
卵巢的大小与年龄和产卵期有关。大多数脊椎动物有两个卵巢,但是部分鱼类的两个卵巢融合为单个结构,而所有鸟类只有左侧卵巢有机能。卵巢是位于子宫两侧的一对卵圆形的生殖器官,它的外表有一层上皮组织,其下方有薄层的结缔组织。卵巢的内部结构可分为皮质和髓质。皮质位于卵巢的周围部分,主要由卵泡和结缔组织构成。髓质位于中央,由疏松结缔组织构成,其中有许多血管、淋巴管和神经。
卵巢颗粒细胞是卵巢的主要功能细胞,其增殖与分化直接影响着卵泡的生长启动、发育、排卵、黄体形成以及甾体激素分泌等卵巢功能活动。卵巢颗粒细胞是卵泡内的最大细胞群,也是主要的功能细胞,卵泡发育的显著标志之一就是颗粒细胞迅速生长及增殖,而成年动物的卵泡闭锁主要是由颗粒细胞凋亡引起,尤其在卵泡发育后期,此外,颗粒细胞还与卵泡膜细胞共同完成卵巢激素的合成,维持着有利于卵母细胞生长和成熟的微环境。细胞形状呈圆形或椭圆形。
方法简介
酶联生物实验室分离的人卵巢颗粒细胞采用先机械分离,而后胶原酶消化,最后差速贴壁法制备而来,细胞总量约为5×105cells/瓶。
质量检测
酶联生物实验室分离的人卵巢颗粒细胞经FSH R 免疫荧光鉴定,纯度可达90% 以上,且不含有H IV -1、H BV 、H C V 、支原体、细菌、酵母和真菌等。
培养信息
培 养 基 :含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptom ycin等
换液频率 :每2-3天换液一次
生长特性 :贴壁
细胞形态 :上皮细胞样
传代特性 :可传1-2代
传代比例 :1:2
消 化 液 :0. 25% 胰蛋白酶
培养条件 :气相 :空气,95% 。C O2,5%
人卵巢颗粒细胞体外培养周期有限。建议使用酶联生物配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养,以此保证该细胞的最佳培养状态。
细胞培养状态
发货时发送细胞电子版照片
使用方法
人卵巢颗粒细胞是一种贴壁细胞,细胞形态呈上皮细胞样,在酶联生物技术部标准操作流程下,细胞可传1-2代。建议您收到细胞后尽快进行相关实验。
客户收到细胞后,请按照以下方法进行操作
1. 取出T 25细胞培养瓶,用75% 酒精消毒瓶身,拆下封口膜,放入37℃、5% C O 2、饱和湿度的细胞培养箱中静置3-4h,以稳定细胞状态。
2. 贴壁细胞消化
1) 吸出T25细胞培养瓶中的培养基,用PBS清洗细胞一次。
2) 添加0. 25% 胰蛋白酶消化液1m L至T 25培养瓶中,轻微转动培养瓶至消化液覆盖整个培养瓶底后,吸出多余胰蛋白酶消化液,37℃温浴1-3min。倒置显微镜下观察,待细胞回缩变圆后,再加入5ml完全培养基终止消化。
3) 用吸管轻轻吹打混匀,按传代比例接种T25培养瓶传代,然后补充新鲜的完全培养基至5m L,置于37℃、5% C O 2、饱和湿度的细胞培养箱中静置培养。
4) 待细胞完全贴壁后,培养观察。之后按照换液频率更换新鲜的完全培养基。
3. 细胞实验
因原代细胞贴壁特殊性,贴壁的原代细胞在消化后转移至其他实验器皿(如玻璃爬片、培养板、共聚焦培养皿等)时,需要对实验器皿进行包被,以增强细胞贴壁性,避免细胞因没贴好影响实验。包被条件常选用鼠尾胶原Ⅰ(2-5μg/cm2) ,多聚赖氨酸PLL(0. 1m g/m l),明胶(0. 1% ),依据细胞种类而定。悬浮/半悬浮细胞无需包被。
注意事项
1. 培养基于4℃条件下可保存3-6个月。
2. 在细胞培养过程中,请注意保持无菌操作。
3. 传代培养过程中,胰酶消化时间不宜过长,否则会影响细胞贴壁及其生长状态。
4. 建议客户收到细胞后前3天每个倍数各拍几张细胞照片,记录细胞状态,便于和酶联生物技术部沟通。由于运输的原因,个别敏感细胞会出现不稳定的情况,请及时和我们联系,详尽告知细胞的具体情况,以便我们的技术人员跟踪、回访直至问题得到解决。