产品名称 : 兔滑膜间充质干细胞
产品品牌 : 酶联生物
组织来源 : 滑膜组织
产品规格 : 5×105cells/T25 细胞培养瓶
细胞简介
兔滑膜间充质干细胞分离自滑膜组织;滑膜组织是位于关节腔内面的内衬结构,滑膜呈淡红色 , 平 滑 闪 光 , 薄 而 柔 润 , 由 疏 松 结 缔 组 织 组 成 。 间 充 质 干 细 胞 (mesenchymalstemcells,MSCs)来源于胚胎时期的中胚层组织,具有很强的自我复制和多向分化潜能,具有向脂肪细胞、成骨细胞、软骨细胞及肌细胞等多种终末细胞定向分化的能力,运用MSCs 来修复软骨损伤具有很好的应用前景,目前已能够从骨髓、脂肪、滑膜、骨骼、肌肉等组织以及羊水、脐带、脐带血中分离和制备间充质干细胞。
方法简介
酶联生物实验室分离的兔滑膜间充质干细胞采用混合酶消化法结合有限稀释法制备而来,细胞总量约为 5×105cells/瓶。
质量检测
酶联生物实验室分离的兔滑膜间充质干细胞经 CD90 免疫荧光鉴定,纯度可达 90%以上,且不含有 HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
培养信息
培 养 基 : 含 FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptom ycin 等
换液频率 : 每 2-3 天换液一次
生长特性 : 贴壁
细胞形态 : 成纤维细胞样
传代特性 : 可传 3-5 代左右
传代比例 : 1:2
消 化 液 : 0.25% 胰蛋白酶
培养条件 : 气相:空气,95% ;C O2,5%
兔滑膜间充质干细胞体外培养周期有限;建议使用酶联生物配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养,以此保证该细胞的佳培养状态。
细胞培养状态
发货时发送细胞电子版照片
使用方法
兔滑膜间充质干细胞是一种贴壁细胞,细胞形态呈成纤维细胞样,在酶联生物技术部标准操作流程下,细胞可传 3-5 代左右;建议您收到细胞后尽快进行相关实验。
客户收到细胞后,请按照以下方法进行操作
1. 取出 T 25 细胞培养瓶,用 75% 酒精消毒瓶身,拆下封口膜,放入 37℃、5% C O 2 饱
和湿度的细胞培养箱中静置 3-4h,以稳定细胞状态。
2. 贴壁细胞消化
1) 吸出 T25 细胞培养瓶中的培养基,用 PBS 清洗细胞一次。
2) 添加 0.25% 胰蛋白酶消化液 1m L 至 T 25 培养瓶中,轻微转动培养瓶至消化液覆盖整
个培养瓶底后,吸出多余胰蛋白酶消化液,37℃温浴 1-3min;倒置显微镜下观察,待细胞
回缩变圆后,再加入 5ml 完全培养基终止消化。
3) 用吸管轻轻吹打混匀,按传代比例接种 T25 培养瓶传代,然后补充新鲜的完全培养基至
5m L,置于 37℃、5% C O 2、饱和湿度的细胞培养箱中静置培养。
4) 待细胞完全贴壁后,培养观察;之后按照换液频率更换新鲜的完全培养基。
3. 细胞实验
因原代细胞贴壁特殊性,贴壁的原代细胞在消化后转移至其他实验器皿(如玻璃爬片、培养板、共聚焦培养皿等)时,需要对实验器皿进行包被,以增强细胞贴壁性,避免细胞因没贴好影响实验;包被条件常选用鼠尾胶原Ⅰ(2-5μg/cm2) ,多聚赖氨酸 PLL(0.1mg/m l),明胶(0.1% ),依据细胞种类而定。悬浮/半悬浮细胞无需包被。
注意事项
1. 培养基于 4℃条件下可保存 3-6 个月。
2. 在细胞培养过程中,请注意保持无菌操作。
3. 传代培养过程中,胰酶消化时间不宜过长,否则会影响细胞贴壁及其生长状态。
4. 建议客户收到细胞后前 3 天每个倍数各拍几张细胞照片,记录细胞状态,便于和酶联生物技术部沟通。由于运输的原因,个别敏感细胞会出现不稳定的情况,请及时和我们联系,
详尽告知细胞的具体情况,以便我们的技术人员跟踪、回访直至问题得到解决。