腺苷脱氨酶(ADA)活性测定试剂盒分光法/48样
产品简介:
腺苷脱氨酶（ADA，EC 3.5.4.4）是一种琉基酶，是嘌呤核苷酸代谢的关键酶，与机体细胞的免疫活性有重要关系。腺苷脱氨酶（ADA）催化腺嘌呤核苷水解，产生次黄嘌呤核苷和氨，利用氨在强碱的环境下与次氯酸盐和苯酚作用，生成水溶性染料靛酚蓝，溶液颜色稳定。其在 630nm 处有特征吸收峰，通过检测氨增加的速率，即可计算该酶活性大小。
所需的仪器和用品:
可见分光光度计、1mL 玻璃比色皿（光径 1cm）、台式离心机、可调式移液枪、研钵、冰和蒸馏水。
腺苷脱氨酶(ADA)活性测定:
1、样本制备：
① 组织样本：
称取约 0.1g 组织（水分足的样本可取 0.2-0.5g），加入 1mL 提取液；进行冰浴匀浆。12000rpm，4℃离心 10min，取上清，置冰上待测。
[注]：也可以按照组织质量（g）：提取液体积(mL)为 1：5~10 的比例提取。
② 液体样本：直接检测；若浑浊，离心后取上清检测。
2、上机检测：
标准曲线制作过程：
1. 标准品母液（10μg/mL 的氨（分子量是 18）），把母液用蒸馏水稀释成以下浓度梯度的标准品：0, 2, 4, 6, 8, 10 μg/mL。也可根据实际样本来调整标准品浓度。
2. 按照显色反应阶段的测定管加样体系操作，根据结果即可制作标准曲线。
标准曲线制作过程：
1. 标准品母液（10μg/mL 的氨（分子量是 18）），把母液用蒸馏水稀释成以下浓度梯度的标准品：0, 2, 4, 6, 8, 10 μg/mL。也可根据实际样本来调整标准品浓度。
2. 按照显色反应阶段的测定管加样体系操作，根据结果即可制作标准曲线。
