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菌株名称 |
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菌株品牌 |
酶联生物 |
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细胞规格 |
100μl |
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菌株抗性 |
无抗 |
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培 养 基 |
YPDA |
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菌株类别 |
酵母菌 |
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培养条件 |
28℃，有氧，YPDA |
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基 因 型 |
MATa,trp1-901,leu2-3,112,ura3-52,his3-200,gal4Δ,gal80Δ,LYS2:: GAL1UAS–Gal1TATA–His3,GAL2UAS–Gal2TATA–Ade2URA3: : MEL1UAS–Mel1TATAAUR1-C MEL1 |
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质粒转化 |
电转 |
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保存方式 |
30%甘油，-20℃ |
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基本应用 |
用于酵母双杂交 |
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菌株简介 |
Y2HGold菌株是Clontech公司开发的GAL4系统酵母双杂实验用菌株，MATa型，可直接转化质粒或与MATα型酵母菌株Y187通过mating操作进行蛋白互作验证或筛库试验。Transformation marker为: trp1, leu2，报告基因为：AbAr, HIS3, ADE2, MEL1。Y2HGold -GAL4酵母双杂系统需要两种质粒配套使用：PGBKT7和PGADT7。质粒PGBKT7的筛选标志为TRP1，用于表达DNA-BD(来自酵母转录因子GAL4N端1~ 174位氨基酸)与目标蛋白(Bait)的融合蛋白；质粒PGADT7的筛选标志为LEU，用于表达AD(GAL4 C端768 ~881 位氨基酸)与目标蛋白（Prey）的融合蛋白。GAL4系统原理：一个完整的酵母转录因子GAL4可分为功能上相互独立的两个结构域：位于N端1 ~ 174位氨基酸区段的DNA结合域（DNA-BD）和位于C端768 ~881 位氨基酸区段的转录激活域(AD)。DNA-BD能够识别GAL4-responsive gene的上游激活序列UAS，并与之结合。而AD可以启动UAS下游的基因进行转录。BD和AD单独存在不能激活转录，但当二者接近时，则呈现完整的GAL4活性，使含有UAS的启动子下游基因转录表达。正常条件下，BD不与AD结合，将要检测的蛋白质分别与BD和AD融合，形成 bait 融合蛋白（bait -BD）和 prey 融合蛋白（prey-AD），如果 bait 和 prey发生相互作用，就会促使 BD 和 AD 的相互接近，形成完整的GAL4，从而激活报告基因的转录。Y2HGold有四个报告基因：AbAr, HIS3, ADE2, MEL1，分别由三种不同的启动子（G1，G2，M1）启动，这三种启动子只有GAL4识别的17bp核心区相同，其余部分均不同，大大降低了酵母双杂假阳性发生的概率。此外新报告基因AbAr与以前的营养缺陷报告基因相比具有更低背景的优点，也可以降低酵母双杂假阳性发生的概率。 |
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供应范围 |
仅供限于科研实验研究使用 |
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运输方式 |
低温快递运输 |
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菌株优势 |
酶联生物菌株库拥有200种菌株 , 遗传性状一致 |
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特别说明 |
细胞培养/动物血清/实验服务/原代提取/菌株购买，请立即与酶联生物联系 |
