细胞品牌 : 酶联生物
细胞规格 : 5x10⁵cells/T25或1mL冻存管
细胞简介 : 小肠位于腹中,上端接幽门与胃相通,下端通过阑门与大肠相连,是食物消化吸收的主要场所。一般根据形态和结构变化将小肠分为三段,分别为十二指肠,空肠和回肠。小肠壁结构一般分4层,由外向内依次为:浆膜层,平滑肌层,粘膜下层和粘膜层。粘膜层又分为3层:靠近粘膜下层的是一层平滑肌,称为粘膜肌层。其次为结缔组织,又称为固有层。最后面向肠腔的是一层柱状上皮细胞构成的粘膜。
成纤维细胞是结缔组织中最常见的细胞,电镜下,成纤维细胞胞质内可见丰富的粗面内质网、游离核糖体和高尔基复合体,表明其具有合成和分泌蛋白质的功能。己知成纤维细胞的主要功能之一是合成胶原蛋白及其他细胞外基质,在组织器官纤维化过程中发挥重要作用。
质量检测 :纤维连接蛋白(Fibronectin)或波形蛋白(Vimentin)免疫荧光染色为阳性,纯度高于 90%,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等
种属来源 :人
组织来源 :正常小肠
生长特性 :贴壁生长
细胞形态 :成纤维细胞样
培 养 基 :人小肠成纤维细胞专用培养基
培养条件 : 气相:95%空气+5%二氧化碳;温度:37℃
换液频率 : 每2-3天换液一次
消 化 液 : 0.25%胰蛋白酶
细胞货期 : 3-4周
发货方式 :复苏发货(免运输费用)/ 冻存发货(需加干冰运输费用)
供应范围 : 仅限于科研实验使用,绝不可作为动物或人类疾病的治疗产品使用
特别说明 :具体操作步骤以随货产品说明书为主
细胞培养操作
收货处理 : 取出T25细胞培养瓶,用75%酒精消毒瓶身,拆下封口膜,放入37℃、5%CO2,饱和湿度的细胞培养箱中静置3-4h,以稳定细胞状态
传代密度 : 细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养
传代比例 : 首次传代建议1:2传代,1:2传代就是1个T25瓶传2个T25瓶或者2个6cm皿。不是1个T25瓶传2个10cm皿
1. 吸出T25细胞培养瓶中的培养基,用PBS清洗细胞一次;
2. 添加0.25%胰蛋白酶消化液1mL至T25培养瓶中,轻微转动培养瓶至消化液覆盖整个培养瓶底后,吸出多余胰蛋白酶消化液,37℃温浴1-3min;倒置显微镜下观察,待细胞回缩变圆后,再加入5ml完全培养基终止消化;
3. 用吸管轻轻吹打混匀,按1:2比例接种T25培养瓶传代,然后补充新鲜的完全培养基至5mL,置于37℃、5%CO2、饱和湿度的细胞培养箱中静置培养;
4. 待细胞完全贴壁后,培养观察;之后每2-3天换液一次新鲜的完全培养基。
注意事项
1. 培养基于4℃条件下可保存3-6个月。
2. 在细胞培养过程中,请注意保持无菌操作。
3. 传代培养过程中,胰酶消化时间不宜过长,否则会影响细胞贴壁及其生长状态。
4. 运输用的培养基(灌液培养基)不能再用来培养细胞,请换用按照说明书细胞培养条件新配制的完全培养基来培养细胞。
到货须知
1. 收到细胞后,首先观察并拍照记录细胞瓶是否完好,培养液是否有漏液、浑浊等现象,干冰运输的细胞检查干冰是否完全挥发,细胞是否解冻,若有上述现象发生请及时和我们联系。
2. 静置完成后,取出细胞培养瓶,镜检、拍照(当天以及第 2,3 天请拍照),记录细胞状态 (所拍照片将作为后续服务依据);建议细胞传代培养后,定期拍照、记录细胞生长状态。
3. 由于运输的原因,部分细胞由于温度变化及剧烈碰撞死亡破碎形成碎片,是正常现象。个别敏感细胞会出现不稳定的情况,请及时和我们联系,告知细胞的具体情况,以便我们的技术人员跟踪回访直至问题解决。
4. 仔细阅读细胞说明书,了解细胞相关信息,如细胞形态、所用培养基、血清比例、所需细胞因子等,确保细胞培养条件一致,若由于培养条件不一致而导致细胞出现问题,责任由客户自行承担。
细胞予重发
1. 细胞运输途中遭遇的各种问题,细胞丢失、瓶身破损、培养液严重漏液等,重发。
2. 收到细胞未开封,如出现污染状况,重发。
3. 收到细胞3天内,发现污染问题,经核实后,重发。
4. 常温发货的细胞静置2小时后,干冰冻存发货的细胞复苏2天后,绝大多数细胞未存活,经核实后,重发。
5. 常温发货的细胞静置22小时并且未开封或干冰冻存发货的细胞复苏2天后,出现污染,经核实后,重发。
6. 细胞活性问题,请在收到产品3天内给我们提出真实的实验结果,用台盼蓝染色法鉴定细胞活力,经核实后,重发。
细胞不予重发
1. 客户操作造成细胞污染,不重发。
2. 客户严重操作失误致细胞状态不好,不重发。
3. 非我们推荐细胞培养体系致的细胞状态不好,不重发。
4. 细胞状态不好,未提供真实清晰的培养前3天的细胞状态照片,不重发。
5. 细胞培养时经其它处理导致细胞出现问题的,不重发。
6. 收到细胞发现问题与客服人员沟通的时间证明大于3天的,不重发。