细胞品牌 :酶联生物
细胞规格 :5x10⁵cells/T25或1mL冻存管
背景介绍 :神经元,又称神经细胞,是构成神经系统结构和功能的基本单位。
神经元是具有长突触(轴突)的细胞,它由细胞体和细胞突起构成。在长的轴突上套有一层鞘,组成神经纤维,它的末端的细小分支叫做神经末梢。细胞体位于脑、脊髓和神经节中,细胞突起可延伸至全身各器官和组织中。
质量检测 :NSE免疫荧光染色为阳性,纯度高于 90%,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等
种属来源 :小鼠
组织来源 : 脑
生长特性 :贴壁生长
细胞形态 :神经元细胞样
培 养 基 :小鼠脊髓神经元细胞完全培养基
培养条件 : 气相:95%空气+5%二氧化碳;温度:37℃
换液频率 :每2-3天换液一次
消 化 液 : 0.25%胰蛋白酶
细胞货期 : 5-6周左右
运输方式 : T25培养瓶 / 顺丰快递(包邮)
供应限制 : 仅限于科学研究,绝不可作为动物或人类疾病的治疗产品使用
供应范围 : 仅限于科研实验使用,绝不可作为动物或人类疾病的治疗产品使用
特别说明 : 具体操作步骤以随货产品说明书为主
细胞培养操作
收货处理 : 取出T25细胞培养瓶,用75%酒精消毒瓶身,拆下封口膜,放入37℃、5%CO2,饱和湿度的细胞培养箱中静置3-4h,以稳定细胞状态
传代特性 : 属于终末分化细胞;属于不增殖细胞群,建议收到细胞后尽快进行相关实验
传代比例 : 不传代
神经元细胞消化方法一
1. 吸出T25细胞培养瓶中的培养基,用PBS(37℃预热)清洗细胞一次;
2. 添加0.25%胰蛋白酶消化液0.5mL至培养瓶中,轻微转动培养瓶至消化液覆盖整个培养瓶底后,37℃温浴1min;倒置显微镜下观察,待细胞回缩变圆后,再加入5ml完全培养基终止消化;
3. 用吸管轻轻吹打混匀、分散细胞,置于37℃、5%CO2、饱和湿度的细胞培养箱中静置培养;
4. 待细胞完全贴壁后,培养观察,之后按换液频率更换新鲜的完全培养基(37℃预热)
神经元细胞消化方法二
1. 吸出T25细胞培养瓶中的培养基,用PBS清洗细胞一次;
2. 添加0.25%胰蛋白酶消化液0.5mL至培养瓶中,轻微转动培养瓶至消化液覆盖整个培养瓶底后,4℃冰箱静置5min;消化后倒置显微镜下观察,待细胞回缩变圆后,再加入5ml完全培养基终止消化;
3. 用吸管轻轻吹打混匀、分散细胞,置于37℃、5%CO2、饱和湿度的细胞培养箱中静置培养;
4. 待细胞完全贴壁后,培养观察,之后按照换液频率更换新鲜的完全培养基(37℃预热)
细胞收货脱落
1. 收集所有细胞悬液,1000rpm,离心5min,保留沉淀;
2. 添加0.25%胰蛋白酶消化液0.5mL至离心管中,重悬沉淀,放置于37℃消化3min(或4℃ 冰箱静置5-7min)消化完向离心管内加入5ml完全培养基终止消化;
3. 经1000rpm,离心5min,丢弃上清,用5ml完全培养基(补加1%FBS,促进贴壁)重悬沉淀,接种于新的培养瓶内;
4. 待细胞完全贴壁后,培养观察,之后按照换液频率更换新鲜的完全培养基(37℃预热)
注意事项
1. 培养基于4℃条件下可保存3-6个月。
2. 在细胞培养过程中,请注意保持无菌操作。
3. 传代培养过程中,胰酶消化时间不宜过长,否则会影响细胞贴壁及其生长状态。
4. 运输用的培养基(灌液培养基)不能再用来培养细胞,请换用按照说明书细胞培养条件新配制的完全培养基来培养细胞。
细胞予重发
1. 细胞运输途中遭遇的各种问题,细胞丢失、瓶身破损、培养液严重漏液等,重发。
2. 收到细胞未开封,如出现污染状况,重发。
3. 收到细胞3天内,发现污染问题,经核实后,重发。
4. 常温发货的细胞静置2小时后,干冰冻存发货的细胞复苏2天后,绝大多数细胞未存活,经核实后,重发。
5. 常温发货的细胞静置22小时并且未开封或干冰冻存发货的细胞复苏2天后,出现污染,经核实后,重发。
6. 细胞活性问题,请在收到产品3天内给我们提出真实的实验结果,用台盼蓝染色法鉴定细胞活力,经核实后,重发。
细胞不予重发
1. 客户操作造成细胞污染,不重发。
2. 客户严重操作失误致细胞状态不好,不重发。
3. 非我们推荐细胞培养体系致的细胞状态不好,不重发。
4. 细胞状态不好,未提供真实清晰的培养前3天的细胞状态照片,不重发。
5. 细胞培养时经其它处理导致细胞出现问题的,不重发。
6. 收到细胞发现问题与客服人员沟通的时间证明大于3天的,不重发。