过氧化氢含量试剂盒荧光法

H2O2 是生物体内最常见的活性氧分子，主要由 SOD 和 XOD 等催化产生，由 CAT 和 POD 等催化降解。H2O2 不仅是重要的活性氧之一，也是活性氧相互转化的枢纽。一方面，H2O2 可以直接或间接地氧化细胞内核酸，蛋白质等生物大分子，并使细胞膜遭受损害，从而加速细胞的衰老和解体；另一方面H2O2 也是许多氧化应急反应中的关键调节因子。

测定原理：

该测定试剂盒使用 Amplex™ Red 试剂（10-乙酰基-3,7-二羟基吩噁嗪）检测过氧化氢 (H2O2)。Amplex™ Red 试剂与辣根过氧化物酶 (HRP) 配合使用以检测从生物样品（包括细胞）中释放或在酶偶联反应中生成的 H2O2。

需自备的仪器和用品：

天平、离心机、荧光酶标仪/酶标仪、移液器、涡旋混匀仪、黑色96孔板/酶标板、匀浆器。

预实验的意义：

比色法检测试剂盒预实验非常重要

1、确定该试剂盒是否适合客户的样本检测，以免造成试剂盒和样本的浪费（比如低表达处理的样本）；

2、熟悉生化试剂盒的操作流程，尤其是初次使用生化试剂盒测定；

3、确定样本的处理方法及稀释倍数是否合适；

4、了解实验过程中可能出现的实验现象或问题，以便于及时作出调整；

5、通过3 - 5组预实验，判断试剂盒对于样本的最佳适应稀释浓度范围，指导实验样本稀释比例。

注  意：正式测定前务必取 3 - 5 个预期差异较大的样本做预测定。