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ELISA试剂盒免疫酶技术

ELISA试剂盒固相载体采用免疫酶技术
免疫酶技术的主要试剂为固相的抗原或抗体、酶标记的抗原或抗体和与标记酶直接关联的酶反应底物。可作固相载体的物质很多,常用的是聚苯乙x烯。聚苯乙x具有较强的吸附蛋白质的性能,抗体或蛋白质抗原吸附其上后保留原来的免疫活性。聚苯乙x为塑料,可制成各种形式,在测定过程中,它作为载体和容器,不参与化学反应,加之它的价格低廉,所以被普遍采用。
聚苯x载体的形状主要有三种:小试管、小珠和微量反应板。小试管的特点是还能兼作反应的容器,然后放入分光光度计中比色。小珠一般为直径0.6cm的圆球,表面经磨砂处理后吸附面积大增加。如用特殊的洗涤器,在洗涤过程中使圆珠滚动淋洗,效果更好。常用的载体为微量反应板,于ELISA测定的产品也称为ELISA板,通用的标准板形是8x12的96孔式。为便于作少量标本的检测,有制成8联或I2联孔条的,放入座架后,大小与标准ELISA板相同。ELISA板的特点是可以同时进行大量标本的检测,并可在特定的比色计上迅速读出结果。现在已有多种自动化仪器用于微量反应板型的ELISA检测,包括加样、洗涤、保温、比色等步骤,对操作的标准化极为有利。
良好的ELISA板应该是吸附性能好,空白值低,孔底透明度高,各板之间和同一板各孔之间性能相近。聚苯乙xELISA板由于配料的不同和制作工艺的差别,各种产品的质量差异很大。因此每一批号的聚苯乙x制品在使用前须检查其性能。常用的检查方法为:以一定浓度的人

IgG(一般为10ng/ml)包被ELISA板各孔后,每孔内加入适当稀释的酶标抗人IgG抗体,保温后洗涤,加底物显色,终止酶反应后分别测每孔溶液的吸光度。控制反应条件,使各读数在0.8左右。计算所有读数的平均值。所有单个读数与平均读数之差应小于10%.与聚苯乙x类似的塑料为聚氯乙x。作为ELISA固相载体,聚氯乙x板的特点为质软板薄,可切割,价廉、但光洁度不如聚苯乙x板。聚氯乙x对蛋白质的吸附性能比聚苯乙x高,但空白值有时也略。

ELISA试剂盒

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