粪链球菌检测板 品牌:酶联生物 规格:5片/包 (4包一盒,20片) 用途:粪链球菌的检测 其它:有效期:12个月 产品详细介绍 1 原理及适用范围 粪链球菌普遍存在于水环境中,为条件致病菌,它来源于人和温血动物的粪便,可以在水中存活很长时间,引起人类疾病。是水体受到粪便污染的重要指标菌,更能客观的反映水质卫生状况。中华人民共和国城镇建设标准在对城市供水、饮用水水质监测中增加了水中粪链球菌的检测指标。粪链球菌检测板是一种预先制备好的一次性培养基产品,含有标准的营养培养基,冷水可溶性的吸水凝胶和脱氢酶指示剂氯化三苯基四氮唑(TTC),菌落在检测板上呈红色带黄晕斑点。本产品适合于生活饮用水、生产加工用水及食品中粪链球菌的测定。执行标准:国家标准《饮用天然矿泉水检验方法》(GB/T 8538);《中华人民共和国城镇建设行业标准》(CJ/T 141~150);《中华人民共和国出入境检验检疫行业标准》(SN/T 1933.1)。 2 操作方法 2.1 水样品检测 2.1.1 水样过滤:将灭菌的过滤装置连接到抽滤瓶上,用灭菌镊子夹取直径47 mm~50 mm,孔径为0.45μm的灭菌滤膜,放在滤器底部,旋紧盖子,将250 mL水样注入滤器中抽滤。 2.1.2 揭开检测板上层膜,在检测板纸片上加1 mL无菌水湿润后,迅速用无菌镊子将过滤水样的滤膜移放在检测板纸片上(滤膜截留细菌面向上),滤膜与纸片之间不要夹留着气泡,贴好上层膜。 2.2 食品样品检测 2.2.1 取25 g(或25 mL)样品放入装有225 mL生理盐水的均质袋中,以8000 r/min均质1~2 min,制成1:10样品均液,根据样品污染程度及检验需要,可进一步制成10倍递增的样品稀释液。 2.2.2 将粪链球菌检测板上层膜不干胶标签部分揭开,用无菌吸管吸取1 mL样品稀释液均匀滴加到纸片上,迅速贴好上层膜并水平晃动检测板,静置10 s左右,待样品稀释液完全被吸附在滤纸上。每个稀释度接种两个检测板作为重复。 2.3 培养:将检测板叠在一起,倒置于恒温培养箱内,36℃±1℃,培养15~24 h。 3 结果判读 在检测板(滤膜)上生长的红色带黄晕的斑点即为粪链球菌阳性,若纸片上的红色斑点无黄晕则为粪链球菌阴性。 4 计数原则及报告方式 4.1 滤膜过滤水样:以滤过一张无菌滤膜后产生的菌落数计算,选择菌落数在20~100CFU的检测板进行计数后即为250 mL水样品中所含的菌落总数。结果以CFU/250 mL为单位报告。 4.2 食品样品计数 4.2.1 以生长有30~300CFU的检测板为计数适宜范围。 4.2.2 若只有一个稀释度检测板上的菌落数在计数合适范围30~300CFU之间,则计算两个检测板菌落数的平均值,再乘以相应的稀释倍数,作为每克(毫升)中菌落总数结果。 4.2.3 若有两个连续稀释度在适宜计数范围内时,按式(1)计算: ∑C N= ———————— •••••••••••••••••••(1) (n1+0.1n2)d 式中: N——样品中粪链球菌菌落数; ∑C——两个连续稀释度检测板(含适宜范围菌落数的检测板)粪链球菌菌落之和; n1——适宜范围菌落数的第一个稀释度(低)检测板个数 n2——适宜范围菌落数的第二个稀释度(高)检测板个数 d——第一稀释度的稀释倍数 示例: 4.2.4 若所有稀释度检测板上均无菌落生长,则以小于1/d(d—最低稀释倍数)计算。 4.2.5 低数值的估算:如果实验样品原液(水及液体饮料)或初始稀释悬液(其他样品)的两个检测板上的菌落数均小于30CFU,计算两个检测板上的菌落数的平均数。计算式(2): ∑C NE = —— •••••••••••••••••••(2) nd 式中: NE——每毫升或每克样品中菌数的估算值; ∑C——两个检测板上菌落数的和; n——检测板的数量; d——样品初始悬液或实际接种悬液的稀释倍数。 4.2.6 大数值的估算:若所有稀释度的检测板上菌落数均大于300CFU,计数最接近300CFU的检测板上的菌落并计算出平均数,其他检测板可记录为多不可计。结果计算式(3): ∑C NE = —— •••••••••••••••••••(3) nd 式中: NE——每毫升或每克样品中菌数的估算值; ∑C——两个检测板上菌落数之和; n——检测板的数量; d——与样品悬液相一致的稀释倍数。 5 结果报告 固体样品以CFU/g为单位报告,液体样品以CFU/mL为单位报告。 6 附加说明 注意使用过的检测板上带有活菌,需及时按照生物安全废弃物处理原则进行处理。